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新版GB4789食品微生物实操培训 [复制链接]

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各有关单位:
  随着食品安全事故不断的出现,国家相关部门对食品行业也提出了更高的要求;作为风险与质量控制的核心。相关实验室规范操作是企业实施食品生产,建立有效质量保证体系,及时发现潜在质量问题,阻止不合格食品流入市场,保证食品安全有效的关键因素。
    2010年以来,食品微生物学检验方法国家标准根据《食品安全法》的要求开始全面修订,大多数修订标准已经陆续公布。这些标准与国际标准全方位接轨,更具有科学性和代表性,但与原标准则有显著的差异。在实际工作中,因对标准具体条款的理解出现偏差,各实验室在人员素质、仪器设备、环境条件、操作方法等方面暴露出各种问题,大大影响了检验结果的准确性,导致目前社会各界对各级食品检验机构技术能力的质疑。为帮助各相关食品检验机构技术人员及时跟进标准动态,进一步提高检验能力,正确做好实验室应对和方法证实工作,在食品安全保障工作中更好地贯彻新标准,中安科检信息技术培训中心特在西安开办“食品微生物检验实际操作技术”专题培训班,本培训课程邀请标准制定者进行专业的理论讲解和技术指导,提升学员的职业技能水平,从而为保证我国的食品安全提供良好的技术支撑。
一、参会对象:
    各食品、饮料、罐头、乳品、水产品、农副产品等生产企业质量管理、微生物检验技术人员、各级食品安全监管及检测部门、高校及相关科研院所等从事微生物教学研究等机构、其他相关行业意向本次学习班的机构及个人等;
二、主要培训内容:
1、理论学习:
    微生物检验的基本技术、食品微生物常规项目检测方法和检测原理介绍、食品微生物检测样品的采集和处理技术、菌种保藏技术等。
2、实际操作培训:
   依据食品企业微生物实验室要求和最新食品安全国家标准 GB4789,进行实际操作培训。
3、培训模式:
(一)、教师演示指导,学员采用真实样品(部分样品加入标准菌种)进行实际检测操作,指导老师现场纠正错误、点评分析。
(二)、基础操作:培养基配制、灭菌,无菌操作,培养基接种,平板划线分离,菌种保藏,显微镜的使用,革兰氏染色观察,生化反应试验等。
(三)、主要培训内容及日程安排:
第一天上午
08:30-12:00(理论授课)
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一、方法学
PCR/恒温Lamp方法
二、检测操作流程(以金色葡萄球菌为例)
1.增菌(参考国标GB4789.10-2010)
1)样品处理
称取 25 g 样品至盛有 225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min 均质 1 min~2 min,或放入盛有 225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min~2 min。若样品为液态,吸取 25 mL 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中,振荡混匀。
增菌液(7.5 %氯化钠肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤)可以用商品化的增菌培养基。
对于不增菌检测,取25g(mL)加入225ml生理盐水中,匀质后直接备检。
2)增菌
将上述样品匀液于36℃培养>6小时(一般过夜培养)
2.增菌液模板DNA制备
          取上述增菌液1mL,加到1.5mL无菌离心管中,8000r/min离心5min,吸弃上清,加入50ulDNA提取液,混匀后100℃加热5min,12000r/min离心5min,取上清备用待测。
    3.PCR/Lamp检测
         根据试剂说明书加样上机检测。

三、设备
1.PCR方法
1)实时荧光定量PCR仪
2)恒温金属浴
3)离心机(微型离心机)
4)移液枪
2.Lamp方法
1)实时荧光恒温检测仪
2)恒温金属浴
3)离心机(微型离心机)
4)移液枪
英闻实时恒温检测箱包含上述设备。
四、优缺点
1.PCR方法技术最成熟,灵敏度、特异性、准确度等各方面优于其他的分子生物学检测方法(包括Lamp),上机后1.5-2小时出结果,试剂成本也略低,但实时荧光定量PCR仪价格要高于恒温检测方法的设备。
2.Lamp方法设备成本略低,上机后40分钟出结果,但检测本底比较高,灵敏度、特异性等略差于PCR方法。
3.PCR和Lamp方法均符合相关的行业标准,在食药监部门可以作为执法检测,安全监管的检测手段。在进出口检验检疫等部门可以作为初筛手段(国标培养法要3-7天才出检测结果)。
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