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ELISA方法检测致病菌 [复制链接]

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一、试验原理
致病菌及毒素检测试剂盒是基于酶联免疫吸附(ELISA)中的三明治夹心法。
1、微孔底部包被有针对致病菌及毒素的特异性抗体
2、如果样品中存在相对应的抗原,它将被抗体捕获吸附,其他的材料被冲洗掉。
3、再加入针对抗原的被酶标记的抗体(酶标记物),三明治夹心反应完成。
4、加入基质,绑缚在抗原上的酶标记物将把基质转换为蓝绿色,如果没有被检抗原存在将不会产生蓝绿色。
二、操作过程
微生物检测过程
第一步:样品+增菌培养基+特效增菌液培养2-3小时
第二步:混合、离心10分钟
第三步:取上清液进行ELISA试验。
毒素检测过程
方法一:样品+双蒸水/Tris缓冲液+特效增菌液;充分混合后离心取上清液,进行ELISA试验。
方法二:对经过培养的样品,取上清液进行毒素检测。
三、实验需要的材料
试剂盒中提供的材料                                              实验室自备的材料
1、洗涤浓缩液                                                  1、恒温箱:35-37°C
2、阳性质控                                                     2、微量移液器: 20mL, 50mL和200&mL
3、阴性质控                                                     3、塑料洗瓶:500mL
4、酶标记物                                                     4、微量移液器吸头
5、基质                                                           5、吸管:1mL
6、终止液                                                        6、耐高温试管
7、微孔板--包被有特异性的抗体                           7、离心机
8、特效增菌液                                                  8、次氯酸钠
9、说明书                                                        9、无菌去离子水或双蒸水
四、保存条件
试剂盒必须保存在2-8°C。不能冰冻。
五、有效期
所有提供的检测试剂盒效期均在1年左右。
所有试剂盒在第一次使用后,必须在2个月内使用完。
六、ELISA方法的优点
快速
用传统微生物培养方法必须等待7天,实验结果出来后,而此种方法在4小时内就可以得到检测结果。
早期预防生产环境的污染。
通过对产品的快速检测,如若在半成品生产阶段就发现致病菌,可以及时的清除处理。
生、熟制品都可以使用该筛选方法,一个增菌肉汤可以用于微生物及其毒素两个试验。
简单、方便
所有的试剂都为直接应用液。
读取结果简单容易。
无样品残留产生的薄膜色带而影响实验结果。
准确、可靠
唯一的高亲和性特克瑞抗体提高了实验的准确性。检测精度:1-5 cfu/1g。
经济的
操作简单方便提高了实验室的工作效率。更可能多的完成实验室的其他工作。
快速的检测结果保证了产品可以尽快的出库。
性能
通过比较研究,证明了与传统的方法具有同样的性能。
应用范围广
广泛的适用于食品、水和生产环境检测,以及化妆品和药品中的成品和半成品材料检测。
根据个人的需要可以选用手工和自动检测两种方法。
七、目前国际上普遍使用的产品
产品名称                                                     检测样品             时间(包括增菌时间) 检测限
金黄色葡萄球菌检测试剂盒                    食品、化妆品、药品      4小时             1-5 cfu/25g
葡萄球菌肠毒素检测试剂盒                     食品、化妆品、药品      2小时             1ng/ml
葡萄球菌肠毒素分型试剂盒                     食品、化妆品、药品      2小时             1ng/ml
肉毒梭菌检测试剂盒                               食品、水                        4小时            1-5 cfu/25g
肉毒毒素检测试剂盒                               食品、水                         4小时             1ng/ml
肉毒毒素分型检测试剂盒                         食品、水                         4小时             1ng/ml
腊样芽孢杆菌检测试剂盒                         食品、化妆品、药品        4小时           1-5 cfu/25g
腊样芽孢杆菌腹泻毒素检测试剂盒           食品、化妆品、药品         2小时             1ng/ml
霍乱弧菌检测试剂盒(01群、0139群)  食品、水                        4小时            1-5 cfu/25g
副溶血性弧菌检测试剂盒                         食品、水                        4小时            1-5 cfu/25g
致贺氏菌检测试剂盒                                食品、水                       4小时            1-5 cfu/25g
假单胞菌属检测试剂盒                            食品、化妆品、药品      4小时            1-5 cfu/25g
弯曲杆菌检测试剂盒                                食品、海产品等              4小时           1-5 cfu/25g
大肠杆菌O157检测试剂盒                       食品、排泄物等             4小时            1-5 cfu/25g
沙门氏菌检测试剂盒                                食品、食品添加剂        4小时             1-5 cfu/25g
李斯特菌检测试剂盒                                食品、水                      4小时             1-5 cfu/25g
欢迎光临:www.jiayonghua.com

[此贴子已经被作者于2005-6-27 14:57:42编辑过]

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3#

请问此方法是否是国家标准的推荐方法?
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4#

国际标准,具有AOAC认证,为目前欧美国家普遍采用的方法。
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5#

你这种检测方法一个项目合计多少钱啊

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6#

您可以发短信给我 具体内容我会email给您

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