一、细菌总数检测实验完整解决方案
菌落总数,是食品、化妆品等产品质量标准的一个重要指标。我国目前仍沿用传统的手工方法,操作极为烦琐,效率十分低下。
如果我们在对样品进行称量稀释时,采用LabPro重量稀释仪,接着用均质仪对固体样品进行均质,均质后的产品原液不需要稀释,直接用AP4000自动螺旋接种仪接种在平板表面,平板在适当温度培养24小时后,利用QCOUNT全自动菌落计数系统进行菌落计数。这样,我们可以使整个检测过程规范化、自动化,大大减少人工操作,明显提高工作效率,消除操作者之间的误差,使结果更准确可靠。
(一)LabPro重量稀释仪
LabPro重量稀释仪是微电脑控制的微生物样品定量稀释仪,可以准确可靠地自动制备样品。它可以按重量喜事样品,也可以将样品分配到确定的体积。
LabPro重量稀释仪使用著名的SciLog TANDEMTM蠕动泵。该泵的专利技术使管或泵速改变时,自动调节压力,与微处理器相连后,确保了泵卓越的准确性。面板的液晶显示器在运行过程中提示用户操作。
控制器可根据样品的重量及所需的稀释液/样品重量比来计算所用的稀释液的数量。比如,样品重量为11.0克,重量比为9,则需要分配99.0克稀释液,完成样品的1:10稀释。由于样品和稀释液的重量在加入稀释液的过程中是连续测量的,分配稀释液的精度可达到0.3%。
(二) BagSystem®系列食品和固体样品均质仪
BagMixer®实验室固体样品均质仪,具有完整的系列产品,解决了微生物检测中的固体样品制备问题。适用于食品、化妆品、医药品和化学品等各种液体和固体样品的均质混匀。
BagSystem®系列食品和固体样品均质仪均质柔和,不损坏和污染样品,不损伤生物样品和微生物,不升温,减少了对细胞的损伤,不产生雾沫,对微生物的回收率高,增加了分析结果的可靠性。处理样品简单快速仅需数十秒-几分钟,并可快速连续处理多个样品。对有毒和致病性的样品,可密封后进行均质,保证了操作者的安全。它是现代微生物检测实验室先进和高效的样品处理装置,是现代实验室的最佳选择。
(三) 自动螺旋接种仪
在细菌学工作中利用微处理器控制的旋转接种仪,将使实验室具备多任务处理能力,可以处理细菌计数、抗菌素敏感试验和诱变性试验。这种独一无二的技术可以节省三分之二的一次性消耗品并大大节约时间和劳力。AUTOPLATE 4000提供比传统接种技术更敏感更好重复性的结果,是FDA细菌分析手册中指明的细菌总数检验的标准方法,并得到AOAC等国际权威组织的认可。
(1) 仪器工作原理
通过接种针将样本涂布于旋转的琼脂平板上,在平板旋转时接种针从中心向边缘移动,同时注射器由多到少排出接种样本。这种独特的接种技术不需要大量的连续稀释,而是沿着旋转轨迹连续减少接种微生物的数量。
(2) 仪器接种模式
AP4000共有8种接种模式:①50μl指数;②100μl指数(用于含较低数量微生物的样本);③缓慢指数(用于湿平板和某些有机成分);④比例(特殊用途);⑤始终20μl(诱变性试验);⑥草坪(LAWN)模式(平板稀释试验);⑦始终100μl模式;⑧始终250μl模式。前6种模式可用于100 mm和150 mm平板,后两种模式只用于100 mm平板。测试程序可确保正确的接种针定位。
(3)仪器特点
l 准确性
接种针自动移动并可旋转,确保高度的准确性和可重复性。
l 敏感性
步进马达驱动,注射器对旋转平板的涂布提供敏感和可重复性的控制。
l 经济性
每毫升4 cfu(菌落计数单位, cfu)(1个菌落, 250μl模式)至400,000 cfu(50μl模式)的样本不需稀释,可以节约三分之二的消耗品和大量时间。
l 简便性
清洗、吸取样品和接种只需一步过程,节省大量时间和劳动。
(四)全自动菌落计数系统
Qcount使用了专利的菌落识别技术,显著提高今日繁忙的微生物实验室的工作效率水平,同Autoplate 4000旋转接种仪联合使用则成为一套完全的全自动接种计数系统。
(一)图像质量
l 高分辨率:内置高解析度的CCD数码照相系统,最小可分辨0.1 mm的菌落。
l 创新性的光学设计:专利待定的光学装置确保均匀的照明,增强了菌落的对比度,消除了环境光线和平板及琼脂表面反光的影响。
l 先进的图像分析系统:专利待定的轮廓分析算法,依据菌落或菌落丛内细微的色调变化来确定菌落。
l 可编辑功能:平板图像储存在数据库内,可供打印或预分析。用户可手工添加或删除菌落,软件将重新算出菌落数并标记手工编辑,处理过程都可记录。
(二)灵活高效
l 自动阈值:所有培养基和微生物的可能结合都已预设,自动确定背景(琼脂)颜色阈值参数。
l 高效:整个分析过程小于1秒,包括重叠的菌落丛。工作人员可以每小时轻松处理400个平板。
l 灵活的数据管理:Qcount系统包括一台高性能计算机,编辑的数据是GPL兼容的,储存为电子数据表或刻录为CD以供储存编辑。
l 键盘输入:手工计数平板的数据资料也可输入数据库。
(五)大肠菌群、大肠杆菌检验
COLI ID选择性显色培养基,专门用于食品样品中大肠菌群的检测计数以及大肠杆菌的鉴定。该培养基含有两种显色物质,可以直接识别大肠菌群和鉴定大肠杆菌,而不需要任何附加试剂。
(一) 该方法的优点
1. 方法简单快速
在单一培养基上进行细菌检测、计数及鉴定,在37℃培养24-48小时后,直接读培养皿上的菌落数。
2. 效率高
在同一温度下同时做大肠菌群计数和大肠杆菌鉴定两个项目。
(二) 认证
该方法得到欧洲AFNOR的官方认可。
二、致病菌检验现状
常见细菌性食物中毒的病原微生物有:1、致病性大肠杆菌(特别是出血性大肠杆菌O157:H7);2、沙门氏菌属;3、致病性弧菌(包括:霍乱弧菌、副溶血性弧菌);4、金黄色葡萄球菌及其肠毒素;5、近年来发现导致细菌性食物中毒的微生物越来越多,包括单核增生李司特菌、空肠弯曲菌等。
因此,包括上述致病菌在内的致病微生物的快速检验,对早日弄清食物中毒的病因,控制疫情,提高食品质检卫生防疫水平非常重要。
致病菌常规检验方法大致是:
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其中,增菌是不可缺少的步骤。
1、如果在增菌后能够利用自动化仪器对标本进行快速筛检,就可以尽快发现在那些标本中可能存在致病菌,可能存在那些致病菌,从而可大大缩小检验范围,集中人力检验可疑标本和可疑致病菌。
2、由于大多数细菌目前没有血清试剂,而传统生化鉴定试验周期长,操作繁琐,试剂质量无法保证,严重影响了致病菌确认工作。
3、选择性分离培养的培养基上挑选可疑菌落需要经验,存在漏检的可能。
4、葡萄球菌肠毒素热稳定性很高,加工后的食物虽然检不出,金黄色葡萄球菌,但仍有可能存在葡萄球菌肠毒素,而肠毒素的常规检验方法需要做动物实验,难度大,周期长。
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