粮食卫生标准的分析方法 [复制链接]

粮食卫生标准的分析方法

　　1　主题内容与适用范围 　　本标准规定了原粮和成品粮中各项卫生指标的分析方法。 　　本标准适用于原粮和成品粮中马拉硫磷、甲拌磷、杀螟硫磷、倍硫磷、敌敌畏、乐果、对硫磷、磷化物、氰化物、氯化苦、二硫化碳、砷、汞、六六六、滴滴涕、黄曲霉毒素B1、镉、氟、曼陀罗籽、麦角、二溴乙烷、七氯、艾氏剂、狄氏剂等卫生指标的测定。 　　2　引用标准 　　GB 2715粮食卫生标准 　　GB 5009.11　食品中总砷的测定方法 　　GB 5009.15　食品中镉的测定方法 　　GB 5009.17　食品中总汞的测定方法 　　GB 5009.18　食品中氟的测定方法 　　GB 5009.19　食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法 　　GB 5009.20　食品中有机磷农药残留量的测定方法 　　GB 5009.22　食品中黄曲霉毒素B1的测定方法 　　3　感官检查 　　具有正常粮食的色泽及气味，不得有发霉变质现象。 　　4　理化检验 　　4.1　马拉硫磷 　　4.1.1　气相色谱法 　　按GB 5009.20测定。 　　4.1.2　铜络合物比色法 　　4.1.2.1　原理 　　马拉硫磷用有机溶剂提取，经氢氧化钠水解后，生成二甲基二硫代磷酸酯，再与铜盐生成黄色络合物，与标准系列比较定量，本方法检出量为25μg。取样量为20g时，最低检出浓度为1.25mg/kg。 　　4.1.2.2　试剂 　　4.1.2.2.1　四氯化碳。 　　4.1.2.2.2　无水乙醇。 　　4.1.2.2.3　硫酸钠溶液(45g/L)：称取4.5g无水硫酸钠，溶于水中，并稀释至100mL。 　　4.1.2.2.4　酸性硫酸钠溶液：100mL硫酸钠溶液(45g/L)中，加2.5mL盐酸，混匀。 　　4.1.2.2.5　二硫化碳－四氯化碳混合液(1＋200)。 　　4.1.2.2.6　盐酸(1＋1)：取50mL盐酸，用水稀释至100mL。 　　4.1.2.2.7　氢氧化钠溶液(240g/L)：取24g氢氧化钠，加水溶解至100mL。 　　4.1.2.2.8　三氯化铁溶液(50g/L)。 　　4.1.2.2.9　硫酸铜溶液(35g/L)：称取3.5g硫酸酮(CuSO4·5H2O)溶于100mL水中。 　　4.1.2.2.10　酚酞－乙醇指示液(10g/L)：称取1g酚酞，加乙醇(95%)溶解并稀释至100mL。 　　4.1.2.2.11　马拉硫磷标准溶液：先将50mL容量瓶准确称量，然后滴入约50mg马拉硫磷，再准确称量，加四氯化碳至刻度，混匀，并计算其浓度。 　　4.1.2.2.12　马拉硫磷标准使用液：临用前于马拉硫磷标准溶液中加四氯化碳稀释至每毫升相当于100.0μg马拉硫磷。 　　4.1.2.3　仪器设备 　　分光光度计。 　　4.1.2.4　分析步骤 　　称取约20.00g粉碎并全部通过20目筛的样品，置于200mL具塞锥形瓶中，加40mL四氯化碳，密塞，振荡2h，然后过滤。 　　吸取20mL滤液于125mL分液漏斗中，加0.2mL二硫化碳－四氯化碳混合液，加10mL酸性硫酸钠溶液，振摇1min静置分层，将四氯化碳层转入另一分液漏斗中，弃去水层。 　　吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL马拉硫磷标准使用液(相当0、50、100、150、200、250μg马拉硫磷)，分别置于125mL分液漏斗中，加四氯化碳至20mL，再各加0.2mL二硫化碳－四氯化碳混合液。 　　于样品溶液及马拉硫磷标准溶液中各加5mL无水乙醇，加0.4mL氢氧化钠溶液(240g/L)，准确激烈振摇1min，立即加入10mL硫酸钠溶液(45g/L)，混匀，加1滴酚酞指示液，用盐酸(1＋1)中和至酚酞将褪色，再用盐酸(1＋11)调pH为3～4(pH试纸试)，再加0.5mL三氯化铁溶液(50g/L)，振摇1min，静置分层(如乳化可离心分离)，弃去四氯化碳层，用2mL四氯化碳洗涤水层，振摇1min，分层后弃去四氯化碳层，如四氯化碳层带黄色，再用四氯化碳洗涤水层。在水层中准确加入4.0mL四氯化碳、0.5mL硫酸铜溶液(35g/L)，准确振摇1min。静置分层后将四氯化碳层通过脱脂棉滤入2cm比色杯中，以四氯化碳调节零点，在20min内于波长415nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。 　　4.1.2.5　计算 　　 　　式中：X1——样品中马拉硫磷的含量，mg/kg； 　　m1——测定用样液中马拉硫磷的质量，μg； 　　m2——样品质量，g； 　　V1——样品提取加入四氯化碳总体积，mL； 　　V2——测定用样品四氯化碳提取液体积，mL。 　　结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 　　4.2　甲拌磷、杀螟硫磷、倍硫磷、敌敌畏、乐果、对硫磷 　　以气相色谱法按GB/T 5009.20测定。 　　4.3　磷化物 　　4.3.1　定性 　　4.3.1.1　原理 　　磷化物遇水和酸放出磷化氢，与硝酸银生成黑色磷化银，如有硫化物存在，同时放出硫化氢，与硝酸银生成黑色硫化银，干扰测定，而硫化氢又能与乙酸铅生成黑色硫化铅，以此证明是否有硫化物干扰。 　　4.3.1.2　试剂 　　4.3.1.2.1　酒石酸。 　　4.3.1.2.2　硝酸银溶液(100g/L)：贮存于棕色瓶中。 　　4.3.1.2.3　乙酸铅溶液(100g/L)。 　　4.3.1.2.4　乙酸镉溶液(100g/L)。 　　4.3.1.3　仪器 　　取200～250mL锥形瓶，配一适宜双孔软木塞或橡皮塞，每孔内塞以内径0.4～0.5cm、长5cm的玻璃管，每管内悬挂一长7cm、宽0.3～0.5cm的滤纸条，临用时，一纸条用硝酸银溶液湿润，另一纸条用乙酸铅溶液湿润。 　　4.3.1.4　分析步骤 　　迅速称取20.00g样品，置于锥形瓶中，加适量水至浸没样品，再加约0.5g酒石酸，立即塞好准备好的双孔塞，使滤纸条末端距液面约5cm，在暗处置40～50℃水浴内加热30min，观察试纸颜色变化情况。如试纸均不变色，表明磷化物负反应或未超过规定，如硝酸银试纸变色，乙酸铅试纸不变色，表示可能有磷化物存在，需再定量，如两种试纸均变色，可能有磷化物和硫化物同时存在或仅有硫化物存在，遇此情况，重取样品，加水后再加5mL乙酸镉溶液(100g/L)，使形成黄色硫化镉沉淀，立即密塞，放置10min，再加酒石酸，操作同前，如硝酸银试纸变黑，乙酸铅试纸不变色，表示有磷化物存在，需再定量。 　　4.3.2　定量 　　4.3.2.1　原理 　　磷化物遇水和酸，放出磷化氢，蒸出后吸收于酸性高锰酸钾溶液中被氧化成磷酸，与钼酸铵作用生成磷钼酸铵，遇氯化亚锡还原成蓝色化合物钼蓝，与标准系列比较定量。本方法检出量为1.0μg，取样量为50g时，最低检出浓度0.020mg/kg。 　　4.3.2.2　试剂 　　4.3.2.2.1　高锰酸钾溶液(16.5g/L)：称取16.5g高锰酸钾，加水溶解后稀释至1000mL，静置三天或加热煮沸3min，冷却，放置过夜，用玻璃棉或石棉过滤备用。 　　4.3.2.2.2　高锰酸钾溶液(3.3g/L)：将高锰酸钾溶液(16.5g/L)用水稀释5倍。 　　4.3.2.2.3　硫酸(1＋17)：取28mL硫酸缓缓加入400mL水中，冷却后加水至500mL。 　　4.3.2.2.4　硫酸(1＋5)：取83.3mL硫酸缓缓加入400mL水中，冷却后加水至500mL。 　　4.3.2.2.5　饱和亚硫酸钠溶液：取28.5g无水亚硫酸钠，加约70mL水，微热溶解后，放冷，稀释至100mL。 　　4.3.2.2.6　钼酸铵溶液(50g/L)。 　　4.3.2.2.7　氯化亚锡溶液：取0.1g氯化亚锡，溶于5mL盐酸中，临用时现配。 　　4.3.2.2.8　磷化物标准溶液：准确称取0.0400g经105℃干燥过的无水磷酸二氢钾，溶于水，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度(可加1滴三氯甲烷以增加保存时间)，此溶液每毫升相当于0.10mg磷化氢 　　4.3.2.2.9　磷化物标准使用液：吸取10.0mL磷化物标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于10μg磷化氢。 　　4.3.2.2.10　盐酸(1＋1)。 　　4.3.2.2.11　饱和硝酸汞溶液。 　　4.3.2.2.12　饱和硫酸肼溶液。 　　4.3.2.2.13　酸性高锰酸钾溶液：高锰酸钾溶液(16.5g/L)和硫酸(2mol/L)等量混和。 　　4.3.2.3　仪器 　　仪器如图1所示。 　　（图略） 　　4.3.2.4　分析步骤 　　样品测定：于三个串联的气体吸收管中各加5mL高锰酸钾溶液(3.3g/L)和1mL硫酸(1＋17)，二氧化碳发生瓶中装大理石碎块，从分液漏斗1中加适量的盐酸(1＋1)，作为二氧化碳发生器，二氧化碳气体顺序经装有饱和硝酸汞溶液、酸性高锰酸钾溶液、饱和硫酸肼溶液的洗气瓶洗涤后，进入反应瓶中(如用氮气代替二氧化碳，可以只通过硫酸肼溶液安全瓶直接进入反应瓶)。预先通二氧化碳(或氮气)5min，打开反应瓶的塞子，迅速投入称好的50g样品，立即塞好瓶塞，加大抽气速度使分液漏斗6中的5mL硫酸(1＋17)和80mL水加至反应瓶中，然后减慢抽气和二氧化碳(或氮气)气流速度，将放置反应瓶的水浴加热至沸半小时，并继续通入二氧化碳(或氮气)。反应完毕后，先除去气体吸收管进气的一端，再除去抽气管的一端，取下三个气体吸收管，分别滴加饱和亚硫酸钠溶液使高锰酸钾溶液褪色，合并吸收管中的溶液至50mL比色管中，气体吸收管用少量水洗涤，洗液并入比色管中，加4.4mL硫酸(1＋5)，2.5mL钼酸铵溶液(50g/L)，混匀。 　　吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL磷化物标准使用液(相当于0、1、2、3、4、5μg磷化氢)，分别放入50mL比色管中，加30mL水，5.4mL硫酸(1＋5)，2.5mL钼酸铵溶液(50g/L)，混匀。于样品及标准管中各加水至50mL混匀，再各加0.1mL氯化亚锡溶液，混匀。15min后，用3cm比色杯，以零管调节零点，于波长680nm处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准色列目测比较。取与处理样品量相同的试剂，按同一操作方法做试剂空白试验。 　　4.3.2.5　计算 　　 　　式中：X2——样品中磷化物的含量(以磷化氢计)，mg/kg； 　　m3——测定用样品磷化物的质量，μg； 　　m4——试剂空白中磷化物的质量，μg； 　　m5——样品质量，g。 　　结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 　　4.3.2.6　以空气代替二氧化碳，空气顺序经装有酸性高锰酸钾溶液，碱性焦性没食子酸溶液(5g焦性没食子酸溶于15mL水，48g氢氧化钾溶于32mL水中，然后两液混合)的洗气瓶洗涤后进入反应瓶。以下操作同上。其装置如图2所示。 　　（图略） 　　4.4　氰化物 　　4.4.1　定性 　　4.4.1.1　原理 　　氰化物遇酸产生氢氰酸。氢氰酸与苦味酸钠作用，生成红色异氰紫酸钠。 　　4.4.1.2　试剂 　　4.4.1.2.1　酒石酸。 　　4.4.1.2.2　碳酸钠溶液(100g/L)。 　　4.4.1.2.3　苦味酸试纸：取定性滤纸剪成长7cm、宽0.3～0.5cm的纸条，浸入饱和苦味酸－乙醇溶液中，数分钟后取出，在空气中阴干，贮存备用。 　　4.4.1.3　仪器 　　取200～300mL锥形瓶，配备一适宜的单孔软木塞或橡皮塞，孔内塞以内径0.4～0.5cm，长5cm的玻璃管，管内悬一条苦味酸试纸，临用时，试纸条以碳酸钠溶液(100g/L)湿润。 　　4.4.1.4　分析步骤 　　迅速称取5g样品，置于100mL锥形瓶中，加20mL水及0.5g酒石酸，立即塞上悬有苦味酸并以碳酸钠湿润的试纸条的木塞，置40～50℃水浴中，加热30min，观察试纸颜色变化。如试纸不变色，表示氰化物为负反应或未超过规定。如试纸变色，需再做定量试验。 　　4.4.2　定量 　　4.4.2.1　原理 　　氰化物在酸性溶液中蒸出后被吸收于碱性溶液中，在PH7.0溶液中，用氯胺T将氰化物转变为氯化氰，再与异烟酸－吡唑酮作用，生成蓝色染料，与标准系列比较定量，本方法检出限为0.15μg，取样量为10g时，最低检出浓度为0.015mg/kg。 　　4.4.2.2　试剂 　　4.4.2.2.1　甲基橙指示液(0.5g/L)。 　　4.4.2.2.2　乙酸锌溶液(100g/L)。 　　4.4.2.2.3　酒石酸。 　　4.4.2.2.4　氢氧化钠溶液(10g/L)。 　　4.4.2.2.5　氢氧化钠溶液(1g/L)。 　　4.4.2.2.6　乙酸(1＋24)。 　　4.4.2.2.7　酚酞－乙醇指示液(10g/L)。 　　4.4.2.2.8　磷酸盐缓冲溶液(0.5mol/L，pH7.0)：称取34.0g无水磷酸二氢钾和35.5g无水磷酸氢二钠，溶于水并稀释至1000mL。 　　4.4.2.2.9　试银灵(对二甲氨基亚苄基罗丹宁)溶液：称取0.02g试银灵，溶于100mL丙酮中。 　　4.4.2.2.10　异烟酸－吡唑酮溶液：称取1.5g异烟酸溶于24mL氢氧化钠溶液(20g/L)中，加水至100mL，另称取0.25g吡唑酮，溶于20mLN－二甲基甲酰胺中，合并上述两种溶液，混匀。 　　4.4.2.2.11　氯胺T溶液：称取1g氯胺T(有效氯含量应在11%以上)，溶于100mL水中，临用时现配。 　　4.4.2.2.12　氰化钾标准溶液：称取0.25g氰化钾，溶于水中，并稀释至1000mL，此溶液每毫升约相当于0.1mg氰化物，其准确度可在使用前用下法标定。 　　取上述溶液10.0mL，置于锥形瓶中，加1mL氢氧化钠溶液(10g/L)，使pH为11以上，加0.1mL试银灵溶液，用硝酸银标准溶液(0.020mol/L)滴定至橙红色［1mL硝酸银标准溶液(0.020mol/L)相当于1.08mg氢氰酸］。 　　4.4.2.2.13　氰化钾标准使用液：根据氰化钾标准溶液的浓度吸取适量，用氢氧化钠溶液(1g/L)稀释成每毫升相当于1μg氢氰酸。 　　4.4.2.3　仪器 　　4.4.2.3.1　250mL玻璃水蒸气蒸馏装置。 　　4.4.2.3.2　分光光度计。 　　4.4.2.4　分析步骤 　　迅速称取10.00g样品，放置于250mL蒸馏瓶中，加适量水使样品全部浸没，加20mL乙酸锌溶液(100g/L)，加1～2g酒石酸，迅速连接好全部装置，冷凝管下端插入盛有5mL氢氧化钠溶液(10g/L)的100mL容量瓶的液面下，缓缓加热，通水蒸气进行蒸馏，收集馏液近100mL，取下容量瓶，加水至刻度，混匀，取10mL蒸馏液置于25mL比色管中。 　　吸取0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5mL氰化物标准溶液(相当于0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5μg氢氰酸)，分别置于25mL比色管中，各加水至10mL。于样品溶液及标准溶液中各加1mL氢氧化钠溶液(10g/L)和1滴酚酞指示液，用乙酸(1＋24)调至红色刚刚消失，加5mL磷酸盐缓冲溶液，加温至37℃左右，再加入0.25mL氯胺T溶液，加塞混合，放置5min，然后加入5mL异烟酸－吡唑酮溶液，加水至25mL，混匀，于25～40℃放置40min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长638nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。 　　4.4.2.5　计算 　　 　　式中：X3——样品中氰化物(以氢氰酸计)的含量，mg/kg； 　　m6——测定用样品液氢氰酸的质量，μg； 　　m7——样品质量，g； 　　V3——样品蒸馏液总体积，mL； 　　V4——测定用蒸馏液体积，mL。 　　结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 　　4.5　氯化苦 　　4.5.1　原理 　　氯化苦可被乙醇钠分解形成亚硝酸盐，在弱酸性溶液中与氨基苯磺酸进行重氮化，然后再与N－1－萘基乙二胺盐酸偶合生成紫红色，与标准系列比较定量，本方法检出限为1.0μg，取样量20g时，最低检出浓度为0.050mg/kg。 　　4.5.2　试剂 　　4.5.2.1　乙醇钠溶液：取金属钠，先用滤纸将表面煤油吸干，并用小刀切去表面被氧化部分(切下表面部分，务必放回煤油中，切勿与水接触)，然后取5g切成碎片，量取1000mL无水乙醇，置于大烧杯中，将切好的金属钠立即分次加入，待作用完毕，杯中不再有气体发生时，移入棕色瓶中备用。 　　4.5.2.2　无水乙醇。 　　4.5.2.3　对氨基苯磺酸溶液(4g/L)：称取0.4g对氨基苯磺酸溶于100mL盐酸(1＋1)中，贮存于棕色瓶中。 　　4.5.2.4　N-1-萘基乙二胺溶液(2g/L)：称取0.2gN－1－萘基乙二胺，溶于100mL水中，贮存于棕色瓶中。 　　4.5.2.5　氯化苦标准贮备溶液：量取约20mL无水乙醇，置于50mL容量瓶中，准确称量后，加入2滴氯化苦，再准确称量，两次的差即为氯化苦质量，加无水乙醇至刻度，混匀。 　　4.5.2.6　氯化苦标准使用液：吸取适量〔按式(4)计算〕氯化苦标准贮备溶液，置于50mL容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.020mg氯化苦，贮存于冰箱中。 　　 　　式中：X4——吸取的标准贮备液的体积，mL； 　　m8——氯化苦质量，mg。 　　4.5.3　仪器 　　分光光度计。 　　4.5.4　分析步骤 　　称取约20.00g样品，置于100mL具塞锥形瓶中，加20mL乙醇钠溶液，盖好，放置暗处8～10h或过夜、过滤，量取5.0mL滤液，置于10mL比色管中。 　　吸取5.0mL氯化苦标准使用液，置于50mL容量瓶中，加20mL乙醇钠溶液，放置暗处8～10h或过夜，再加无水乙醇稀释至刻度，然后吸取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL此液(相当于0、2、4、6、8、10μg氯化苦)，分别置于10mL比色管中，再各加无水乙醇至5mL，加乙酸(36%)1mL。 　　于样品及标准管中各加1mL对氨基苯磺酸(4g/L)，混匀，静置3～5min后，各加入0.5mLN－1－萘基乙二胺溶液(2g/L)，加无水乙醇至刻度，混匀后放置20min，用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。 　　4.5.5　计算 　　 　　式中：X5——样品中氯化苦的含量，mg/kg； 　　m9——测定用样品中氯化苦的质量，μg； 　　V5——样品中加入乙醇钠总体积，mL； 　　V6——测定用样品滤液的体积，mL； 　　m10——样品质量，g。 　　结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 　　4.6　二硫化碳 　　4.6.1　原理 　　二硫化碳与二乙胺作用生成二乙胺磺酸，再与铜盐反应生成黄色复盐，与标准系列比较定量，本方法检出限为5μg，取样量为25g时，最低检出浓度为0.20mg/kg。 　　4.6.2　试剂 　　4.6.2.1　二乙胺－乙醇溶液(10g/L)。 　　4.6.2.2　乙酸铜－乙醇溶液(0.5g/L)。 　　4.6.2.3　硫酸铜溶液(50g/L)。 　　4.6.2.4　二硫化碳标准贮备溶液：量取约20mL二乙胺乙醇溶液(10g/L)，置于50mL容量瓶中，准确称量后，加入2滴二硫化碳，再准确称量，两次的差即为二硫化碳质量，加二乙胺乙醇溶液(10g/L)至刻度，混匀。 　　4.6.2.5　二硫化碳标准使用液：吸取适量(按式(6)计算)二硫化碳标准溶液，置于50mL容量瓶中，加二乙胺乙醇溶液(10g/L)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.020mg二硫化碳。 　　 　　式中：X6——吸取二硫化碳标准贮备液的体积，mL； 　　m11——二硫化碳质量，mg。 　　4.6.2.6　乙醇(95%)。 　　4.6.3　仪器 　　4.6.3.1　装置如图3。 　　4.6.3.2　分光光度计。 　　（图略） 　　4.6.4　分析步骤 　　称取约25.00g样品，置于500mL圆底烧瓶中，加入水适量至浸没样品，于气体吸收管内各加入10mL二乙胺乙醇溶液(10g/L)，洗气瓶中加入50mL硫酸铜溶液(50g/L)，以除去空气中的硫化物，再将圆底烧瓶置于70℃左右的水浴锅中，按图3连接好洗气瓶、吸收管、抽气装置，缓缓抽气2h后，取下气体吸收管。停止加热和抽气。 　　将气体吸收管中吸收液倒入50mL容量瓶中，用少量二乙胺乙醇溶液(10g/L)洗气体吸收管2～3次，洗液并入容量瓶中，再用二乙胺乙醇溶液(10g/L)加至刻度，混匀。吸取5.0mL置于25mL比色管中。 　　吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL二硫化碳标准使用液(相当0、10、20、30、40、50μg二硫化碳)，分别置于25mL比色管中，再各加二乙胺乙醇溶液(10g/L)至10mL，混匀。 　　于样品及标准管中各加1mL乙酸铜乙醇溶液(0.5g/L)，再加乙醇至刻度，混匀。用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长400nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。 　　4.6.5　计算 　　 　　式中：X7——样品中二硫化碳的含量，mg/kg； 　　m12——测定用吸收稀释液中二硫化碳的质量，μg； 　　m13——样品质量，g； 　　V7——样品吸收稀释液总体积，mL； 　　V8——测定用样品吸收稀释液体积，mL。 　　结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 　　4.7　砷 　　按GB/T 5009.11操作。 　　4.8　汞 　　按GB/T 5009.17操作。