水解度的测定方法(三氯乙酸法测定蛋白质的水解度TCA)
方法原理:
根据蛋白质在三氯乙酸中沉淀,而酶解反应的物质溶于三氯乙酸的原理,用凯氏定氮的方法准确测定其含量。
DH%=TCA中的N/溶液中的总N*100%
方法:
用10ml ,2%的蛋白质溶液,加入乙酸盐缓冲溶液5ml,调到所需的PH值,充分溶解搅匀,取1。5ml样品溶液加入1ml ,0。4M的三氯乙酸,待其完全沉淀后,用微量凯氏定氮的方法测定滤液中的总氮,及样品溶液中的总氮。
另一方法:
用60ml,10%的蛋白质溶液,充分溶解搅匀,样品溶液中40ml ,0。4M的三氯乙酸,待其完全沉淀后,用微量凯氏定氮的方法测定滤液中的总氮,及样品溶液中的总氮。