1 主题内容与适用范围
本标准规定了出口牛肉中敌敌畏、二嗪磷、倍硫磷、马拉硫磷残留量的抽祥和测定方法。
本标准适用于出口牛肉中敌敌畏、二嗪磷、倍硫磷、马拉硫磷残留量的检验。
2 抽样和制样
2.1 检验批
以不超过5000箱为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同的包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2 样本的大小
批量 最低抽取数
500箱及以下 5箱
501～1000箱 7箱
1001～3000箱 11箱
3001～4000箱 13箱
4001～5000箱 15箱
2.3 抽样工具和方法
每箱取样一包, 去掉塑料薄膜, 从每包中抽取肉样100～200g, 总样量不少于1kg, 放入清洁的容器内,并填写样品标签, 注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、取样人,送交实验室。
2.4 实验室样品及试样的制备
将收到的实验室样品，缩分出具有代表性的试样不少于500g，装入清洁的容器中，并在样品标签上注明品名、日期、报验号、申请单位，取样人等，在0℃以下保存，待测。
注：在抽样和制样的操作中，必须防止样品受到污染和发生任何变化。
3 测定方法
3.1 方法提要
用乙腈-水溶液提取试样，加入乙酸锌，消除脂肪，用三氯甲烷萃取、净化，萃取液浓缩定容后，注入配有火焰光度检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。
3.2 试剂和材料
3.2.1 乙腈: 分析纯，重蒸馏。
3.2.2 蒸馏水：重蒸馏。
3.2.3 三氯甲烷：分析纯，重蒸馏。
3.2.4 无水硫酸钠：650℃灼烧4h，贮于干燥器中备用。
3.2.5 乙酸锌：分析纯。
3.2.6 敌敌畏、二嗪磷、倍硫磷、马拉硫磷标准品：纯度均大于99％。
3.2.7 乙腈-水溶液(1＋1)。
3.2.8 无水硫酸钠溶液(20g/L)：将2g灼烧过的无水硫酸钠(3.2.4)溶于100mL蒸馏水中。
3.2.9 农药标准溶液：准确称取适量的敌敌畏、二嗪磷、倍硫磷、马拉硫磷标准品(3.2.6)，用三氯甲烷配制成浓度为1mg/mL的混合标准储备溶液，根据需要再配制成适宜浓度的混合标准工作溶液。
3.3 仪器和设备
3.3.1 气相色谱仪并配有火焰光度检测器：磷滤光片526nm。
3.3.2 磨粉机。
3.3.3 组织捣碎机。
3.3.4 旋转蒸发器。
3.3.5 振荡器。
3.3.6 无水硫酸钠柱：筒形漏斗15cm×1.5cm(内径)，内装5cm高无水硫酸钠。
3.3.7 微量注射器：10μL。
3.4 测定步骤
3.4.1 提取
称取20.0 g试样置于具塞锥形瓶中, 加乙腈-水溶液(3.2.7) 100mL和乙酸锌(3.2.5)1.0g，在振荡器上振荡45min后通过定性滤纸过滤，收集滤液于锥形瓶中。
3.4.2 净化
将全部滤液置于装有硫酸钠溶液(3.2.8)的分液漏斗中，取乙腈(3.2.1)40mL分四次洗涤锥形瓶中的肉渣，将洗涤液滤入分液漏斗，取50mL三氯甲烷洗涤锥形瓶中肉渣，然后将洗涤液滤入分液漏斗中，强烈振摇分液漏斗2 min，静置分层。再分别用三氯甲烷50mL、30mL萃取二次，合并全部三氯甲烷萃取液，在53±2℃下，用旋转蒸发器浓缩至10mL左右,过硫酸钠柱(3.3.6)。用三氯甲烷定容至25mL，供气相色谱测定。
3.4.3 测定
3.4.3.1 色谱条件
a. 色谱柱：玻璃柱，2m×2.6mm(内径)，填充物为4％(m/m)SE-30＋6％(m/m)OV-210涂于Chrom Q(80～100筛目)上。
b. 色谱柱温度：190℃。
c. 检测器温度：230℃。
d. 进样口温度：230℃。
e. 载气：高纯氮，纯度＞99.99％，71mL/min。
f. 燃气：氢气，纯度＞99.9％，82.5mL/min。
g. 助燃气：空气，47.5mL/min。
在上述操作条件下,保留时间分别为:敌敌畏1.6min; 二嗪磷4.30min;倍硫磷9.46min;马拉硫磷12.2min。
3.4.3.2 色谱测定
用微量注射器准确吸取适量的样液注入气相色谱仪，并测量其峰高，用相应的工作曲线估计样液中农药的大约浓度，然后取与样液中农药浓度最相近的标准工作溶液，与样液同时进行色谱测定。
3.4.4 空白试验：按上述有关步骤进行试剂空白试验。
3.5 结果计算
用色谱数据处理机或下列公式计算含量：
x＝（H1·c·V）/（H2·m）
式中：x——农药残留量，mg/kg；
H1——样液中农药峰高，mm；
H2——标准工作溶液中农药峰高，mm；
c——标准工作溶液中农药浓度，μg/mL；
m——所取试样质量，g；
V——样液定容体积，mL。
注：计算结果需将空白值扣除。
