GB T15038-2005 葡萄酒、果酒通用分析方法三 [复制链接]

GB/T 15038―2005   代替 GB/T 15038-1994
前    言
本标准是对GB/T 15038－1994《葡萄酒、果酒通用试验方法》的修订。
本标准代替GB/T 15038－1994。
本标准与原标准GB/T 15038－1994的主要变化如下：
――将酒精度分析方法中的密度瓶法调整为第一法；气相色谱法改为第二法；酒精计法仍为第三法；
――增加了柠檬酸、甲醇的分析方法；
――增补了防腐剂的分析方法；
――去掉了总糖测定中的液相色谱法；
――总酸测定中电位滴定法滴定终点pH＝9.0改为pH＝8.2；
――挥发酸测定中修正方法做了适当修改；
――将“葡萄酒中的糖分和有机酸的测定（HPLC法）”作为资料性附录放在附录D中；
――将“葡萄酒中白藜芦醇的测定”作为资料性附录放在附录E中；
――将“葡萄酒、山葡萄酒感官评分细则标准用语” 作为资料性附录放在附录F中。
本标准的附录A、附录B、附录C为规范性附录，附录D、附录E、附录F为资料性附录。

本标准由中国轻工业联合会提出。
本标准由全国食品工业标准化技术委员会酿酒分技术委员会归口。
本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、烟台张裕葡萄酿酒有限公司、中法合营王朝葡萄酿酒有限公司、中国长城葡萄酒有限公司、国家葡萄酒质量监督检验中心、新天国际葡萄酒业股份有限公司。
本标准主要起草人：郭新光、马佩选、任一平、王晓红、张春娅、王焕香、黄百芬。

 
葡萄酒、果酒通用分析方法
1 范围
本标准规定了葡萄酒、果酒产品检验的基本原则和分析方法。
本标准适用于葡萄酒、果酒产品的分析。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 601 化学试剂  滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备
GB/T 602 化学试剂  杂质测定用标准溶液的制备
GB/T 603 化学试剂  试验方法中所用制剂及制品的制备

3 感官分析
3.1  原理
感官分析系指评价员通过用口、眼、鼻等感觉器官检查产品的感官特性，即对葡萄酒、果酒产品的色泽、香气、滋味及典型性等感官特性进行检查与分析评定。
3.2  品酒
3.2.1品尝杯
品尝杯见图1。
3.2.2  调温
调节去除标贴后的酒的温度，使其达到：起泡、加气起泡葡萄酒 9℃～10℃；白葡萄酒（普通） 10℃～11℃；桃红葡萄酒12℃～14℃；白葡萄酒（优质）13℃～15℃；红葡萄酒（干、半干、半甜）、果酒（半干、半甜）16℃～18℃；加香葡萄酒、甜红葡萄酒、甜果酒18℃～20℃。
3.2.3  顺序和编号
在一次品尝检查有多种类型样品时，其品尝顺序为：先白后红，先干后甜，先淡后浓，先新后老，先低度后高度。按顺序给样品编号，并在酒杯下部注明同样编号。
3.2.4  倒酒
将调温后的酒瓶外部擦干净，小心开启瓶塞（盖），不使任何异物落入。将酒倒入洁净、干燥的品尝杯中，一般酒在杯中的高度为1／4～1／3，起泡和加气起泡葡萄酒的高度为1／2。
3.3  感官检查与评定
3.3.1  外观
在适宜光线（非直射阳光）下，以手持杯底或用手握住玻璃杯柱，举杯齐眉，用眼观察杯中酒的色泽、透明度与澄清程度，有无沉淀及悬浮物；起泡和加气起泡葡萄酒要观察起泡情况，作好详细记录。
3.3.2  香气
先在静止状态下多次用鼻嗅香，然后将酒杯捧握手掌之中，使酒微微加温，并摇动酒杯，使杯中酒样分布于杯壁上。慢慢地将酒杯置于鼻孔下方，嗅闻其挥发香气，分辨果香、酒香或有否其他异香，写出评语。
3.3.3  滋味
喝入少量样品于口中，尽量均匀分布于味觉区，仔细品尝，有了明确印象后咽下，再体会口感后味，记录口感特征。
3.3.4  典型性
根据外观、香气、滋味的特点综合分析，评定其类型、风格及典型性的强弱程度，写出结论意见（或评分）。
4 理化分析
4.1  酒精度
4.1.1 密度瓶法
4.1.1.1 原理
以蒸馏法去除样品中的不挥发性物质，用密度瓶法测定馏出液的密度。根据馏出液（酒精水溶液）的密度，查附录A（规范性附录），求得20℃时乙醇的体积百分数，％（体积分数），即酒精度。
4.1.1.2  仪器
4.1.1.2.1  分析天平：感量 0.0001 g。
4.1.1.2.2  全玻璃蒸馏器：500 mL。
4.1.1.2.3  高精度恒温水浴：20.0±0.1℃。
4.1.1.2.4  附温度计密度瓶：25或50 mL。
4.1.1.3  试样的制备
用一洁净、干燥的 100 mL容量瓶准确量取100mL样品（液温 20℃）于 500 mL蒸馏瓶中，用 50mL水分三次冲洗容量瓶，洗液并入蒸馏瓶中，再加几颗玻璃珠，连接冷凝器，以取样用的原容量瓶作接收器（外加冰浴）。开启冷却水，缓慢加热蒸馏。收集馏出液接近刻度，取下容量瓶，盖塞。于 20 ℃水浴中保温 30 min，补加水至刻度，混匀，备用。
4.1.1.4  分析步骤
4.1.1.4.1  蒸馏水质量的测定
a) 将密度瓶洗净并干燥，带温度计和侧孔罩称量。重复干燥和称量，直至恒重（m）。
b) 取下温度计，将煮沸冷却至 15℃左右的蒸馏水注满恒量的密度瓶，插上温度计，瓶中不得有气泡。将密度瓶浸入 20.0±0.1℃的恒温水浴中，待内容物温度达20℃，并保持 10 min不变后，用滤纸吸去侧管溢出的液体，使侧管中的液面与侧管管口齐平，立即盖好侧孔罩，取出密度瓶，用滤纸擦干瓶壁上的水，立即称量（m1）。
4.1.1.4.2  试样质量的测量
将密度瓶中的水倒出，洗净并使之干燥，然后装满5.1.1.3条制备的试样，按5.1.1.4.1b同样操作，称量（m2）。
4.1.1.5  结果计算：
式中：     ――试样馏出液在20℃时的密度，g／L；
m――密度瓶的质量，g；
m1――20℃时密度瓶与充满密度瓶蒸馏水的总质量，g；
m2――20℃时密度瓶与充满密度瓶试样馏出液的总质量，g；
ρ0――20℃时蒸馏水的密度（998.20 g／L）；
A――空气浮力校正值；
ρa――干燥空气在 20℃、1 013.25 hPa时的密度值（≈1.2 g／L）；
997.0――在20℃时蒸馏水与干燥空气密度值之差，g／L。
根据试样馏出液的密度 ，查附录A（规范性附录），求得酒精度。
所得结果表示至一位小数。
4.1.1.6  精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1％ 。
4.1.2 气相色谱法
4.1.2.1 原理
试样被气化后，随同载气进入色谱柱，利用被测定的各组分在气液两相中具有不同的分配系数，在柱内形成迁移速度的差异而得到分离。分离后的组分先后流出色谱柱，进入氢火焰离子化检测器，根据色谱图上各组分峰的保留值与标样相对照进行定性；利用峰面积(或峰高)，以内标法定量。
4.1.2.2 试剂与溶液
4.1.2.2.1  乙醇：色谱纯（GR），作标样用。
4.1.2.2.2  正丙醇：色谱纯（GR），作内标用。
4.1.2.2.3  乙醇标准溶液（A）：用 5个100 mL容量瓶分别吸取2.00，3.00，3.50，4.00，4.50 mL乙醇（4.1.2.2.1），再分别用水定容至 100 mL。
4.1.2.2.4  乙醇标准溶液（B）：用5个 10 mL容量瓶分别准确量取 10.00 mL不同浓度的乙醇溶液标准（A）（4.1.2.2.3），再分别加入 0.50 mL正丙醇内标溶液，混匀。该溶液用于标准曲线的绘制。
4.1.2.3  仪器和设备
4.1.2.3.1  气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID）。
4.1.2.3.2  色谱柱（不锈钢或玻璃）： 2m × 2 mm或3 m × 3 mm，固定相：Chromosorb 103，60～80目。或采用同等分析效果的其他柱材料。
4.1.2.3.3  微量注射器。
4.1.2.4  试样的制备
将样品准确稀释4倍（或根据酒度适当稀释），然后吸取 10.00 mL于10 mL容量瓶中，准确加入0.50 mL正丙醇内标溶液，混匀。
4.1.2.5  分析步骤
4.1.2.5.1  色谱条件
柱温：200℃；
气化室和检测器温度：240℃；
载气流量（氮气）：40 mL／min；
氢气流量：40 mL／min；
空气流量：500 mL／min。
不同仪器，通过试验选择最佳操作条件，即使乙醇和正丙醇获得完全分离，并使乙醇在 1 min左右流出（典型色谱图见图 2）。
4.1.2.5.2  标准曲线的绘制：分别吸取 0.3μL乙醇标准溶液 B（ 4.1.2.2.4），快速从进样口注入色谱仪，以标样峰面积和内标峰面积比值对酒精浓度做标准曲线（或建立相应的回归方程）。
4.1.2.5.3  试样的测定：吸取0.3μL的试样（4.1.2.4），按4.1.2.5.2操作。
4.1.2.6  结果计算
用试样组分峰面积与内标峰面积的比值查标准曲线得出的值（或用回归方程计算出的值），乘以稀释倍数，即为酒样中的酒精含量。所得结果应表示至一位小数。
4.1.2.7精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1％ 。
4.1.3 酒精计法
4.1.3.1 原理
以蒸馏法去除样品中的不挥发性物质，用酒精计法测得酒精体积百分数示值，按附录B(规范性附录)加以温度校正，求得 20℃时乙醇的体积百分数，即酒精度。
4.1.3.2  仪器
4.1.3.2.1  酒精计（分度值为0.1度）。
4.1.3.2.2  全玻璃蒸馏器：1 000 mL。
4.1.3.3  试样的制备
用一洁净、干燥的 500 mL容量瓶准确量取 500 mL（具体取样量应按酒精计的要求增减）样品（液温 20℃）于1000 mL蒸馏瓶中，以下操作同4.1.1.3。
4.1.3.4  分析步骤
将按 4.1.1.3条制得的试样倒入洁净、干燥的 500 mL量筒中，静置数分钟，待其中气泡消失后，放入洗净、干燥的酒精计，再轻轻按一下，不得接触量筒壁，同时插入温度计，平衡5 min，水平观测，读取与弯月面相切处的刻度示值，同时记录温度。根据测得的酒精计示值和温度，查附录B，换算成20℃时酒精度。所得结果表示至一位小数。
4.1.3.5精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1％ 。 

4.2  总糖（以葡萄糖计）
4.2.1 直接滴定法
4.2.1.1 原理
利用费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以示终点。根据样品消耗量求得总糖或还原糖的含量。
4.2.1.2 试剂和材料
4.2.1.2.1  盐酸溶液（1＋1）。
4.2.1.2.2  氢氧化钠溶液：200 g／L。
5.2.1.2.3  标准葡萄糖溶液 2.5 g／L：精确称取 2.5g（称准至0.0001g）在105～110℃烘箱内烘干3h并在干燥器中冷却的葡萄糖，用水溶解并定容至1 000 mL。
4.2.1.2.4  次甲基蓝指示液 10g／L：称取 1.0 g次甲基蓝，溶解于水中，稀释至 100mL。
4.2.1.2.5  费林溶液
a) 配制：按GB/T 603配制。
b) 标定预备试验：吸取费林溶液Ⅰ、Ⅱ 各 5.00 mL于 250 mL三角瓶中，加 50 mL水，摇匀，在电炉上加热至沸，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色将消失呈红色时，加2滴次甲基蓝指示液，继续滴至蓝色消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
c) 正式试验：吸取费林溶液Ⅰ、Ⅱ各 5.00 mL于 250 mL三角瓶中，加 50 mL水和比预备试验少 1 mL的葡萄糖标准溶液，加热至沸，并保持 2 min，加 2滴次甲基蓝指示液，在沸腾状态下于 1 min内用葡萄糖标准溶液滴至终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。
d）计算
式中： F――费林溶液Ⅰ、Ⅱ各 5 mL相当于葡萄糖的克数，g；
m――称取葡萄糖的质量，g；
V――消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL。
4.2.1.3 试样的制备
4.2.1.3.1  测总糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于100mL容量瓶中，使之所含总糖量为 0.2～0.4 g，加 5 mL盐酸溶液（1＋1）.加水至 20 mL，摇匀。于 68±1℃水浴上水解 15 min，取出，冷却。用200 g／L氢氧化钠溶液中和至中性，调温至 20℃，加水定容至刻度（V2）。
5.2.1.3.2  测还原糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于 100 mL容量瓶中，使之所含还原糖量为 0.2～0.4g，加水定容至刻度。
4.2.1.4  分析步骤
以试样代替葡萄糖标准溶液，按4.2.1.2.5b同样操作，记录消耗试样的体积（V3），结果按式（4）计算。
测定干葡萄酒样品按4.2.1.2.5b操作时，正式滴定需用葡萄糖标准溶液滴定至终点。结果按式（5）计算。
4.2.1.5  结果计算
式中：X――总糖或还原糖的含量，g／L；
F――费林溶液Ⅰ、Ⅱ各 5 mL相当于葡萄糖的克数，g；
V1――吸取的样品体积，mL；
V2――样品稀释后或水解定容的体积，mL；
V3――消耗试样的体积，mL；
G――葡萄糖标准溶液的准确浓度，g／mL；
V――消耗葡萄糖标准溶液的体积，mL。
所得结果应表示至一位小数。
4.2.1.6精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2％ 。
4.2.2 间接碘量法
4.2.2.1 原理
被测样品与过量的费林溶液共沸，其中所含的还原糖将二价铜离子还原成氧化亚铜。剩余的二价铜离子在酸性条件下与碘离子反应生成定量的碘。以疏代硫酸钠标准溶液滴定生成的碘，从而计算出样品中总糖或还原糖的含量。
4.2.2.2  试剂和材料
4.2.2.2.1  硫酸溶液（1＋5）。
4.2.2.2.2  碘化钾溶液 200 g／L。
4.2.2.2.3  盐酸溶液（1＋1）。
4.2.2.2.4  氢氧化钠溶液 200 g／L。
4.2.2.2.5  费林溶液Ⅰ、Ⅱ：同4.2.1.2.5。
4.2.2.2.6  硫代硫酸钠标准滴定溶液c（Na2S2O3）=0.1 mol／L：按GB/T 601配制与标定。
4.2.2.2.7  淀粉指示液 10 g／L：按GB/T 603配制。
4.2.2.3  试样的制备
    同4.2.1.3 。
4.2.2.4 分析步骤
在 250 mL标准磨口三角瓶中，准确加入斐林氏 A、B液各 5.00 mL、50.00 mL水、10.00 mL试样（4.2.2.3），摇匀，放两粒玻璃珠，装上标准磨口回流冷凝器，在 800W加热器上，于 2min之内将溶液加热至沸。从溶液完全开始沸腾时计时，准确保持沸腾2 min，立即取下，在冷水浴中冷却。待溶液完全冷却后，边摇边加入 5 mL碘化钾溶液和 5 mL硫酸溶液，立即用硫代硫酸钠标准滴定溶液进行滴定，接近终点（溶液呈淡黄色）时加入 1 mL淀粉指示液继续滴定至乳白色即为终点。记下硫代硫酸钠标准滴定溶液消耗的体积（V1）。以水代替试样做空白试验，得出（V0）。
4.2.2.5  结果计算
式中：X――总糖或还原糖的含量（以葡萄糖计），g／L；
c――硫代硫酸钠标准溶液的物质的量浓度，mol／L；
V0――空白试验消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；
V1――试样滴定时消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；
V2――吸取的试样体积，mL；
V3――样品稀释或水解定容的体积，mL；
V4――测量时吸取的试样的体积，mL；
f――铜、糖之间氧化还原比值〔以与c×（V0－V1）×63.55值最接近的数，查表1、表2而得〕；
63.55――铜的摩尔质量，g。
所得结果应表示至一位小数。

                                            表1  测总糖用表

 c×(V0-V1) ×63.55      8.80   18.50  27.00  36.00  44.00  53.00  61.00  69.00  77.00  84.00
 
            f                        0.525  0.535  0.545  0.550  0.555  0.559  0.563  0.568  0.576  0.585
 
                                             表2  测还原糖用表
 
C×(V0-V1) ×63.55     9.00   19.50  28.50  37.00  46.50  55.00  63.00  71.00  78.00  85.00
 
                 f                0.520  0.526  0.530  0.535  0.540  0.545  0.550  0.557  0.565  0.575
 
4.2.2.6精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2％ 。

4.3  干浸出物
4.3.1 原理
用密度瓶法测定样品或蒸出酒精后的样品的密度，然后用其密度值查附录C（规范性附录），求得总浸出物的含量。再从中减去总糖的含量，即得干浸出物的含量。
4.3.2  仪器
4.3.2.1  瓷蒸发皿：200 mL。
4.3.2.2  高精度恒温水浴：同5.1.1.2.3。
4.3.2.3  附温度计密度瓶：同5.1.1.2.4。
4.3.3  试样的制备
用 100 mL 容量瓶量取 100 mL样品（20℃），倒入 200 mL瓷蒸发皿中，于水浴上蒸发至约为原体积的 1／3取下，冷却后，将残液小心地移入原容量瓶中，用水多次荡洗蒸发皿，洗液并入容量瓶中，于 20 ℃定容至刻度。
也可使用5.1.1.3中蒸出酒精后的残液，在20℃时以水定容至 100 mL。
4.3.4  分析步骤
方法一：取 4.3.3试样，按4.1.1.4同样操作，并按 4.1.1.5计算出脱醇样品 20 ℃时的密度ρ1。以 ρ1×1.001 8的值，查附录 C，得出总浸出物含量（g／L）。
方法二：直接取未经处理的样品，按5.1.1.4同样操作，并按5.1.1.5计算出该样品20℃时的密度ρB。按下式计算出脱醇样品20℃时的密度 ρ2，以ρ2查附录 C，得出总浸出物含量（g／L）。
ρ2＝1.00180(ρB-ρ)+1000…………………… (7)
式中：ρ2――脱醇样品20℃时密度，g／L；
ρB――含醇样品 20℃时密度，g／L；
ρ――与含醇样品含有同样酒精度的酒精水溶液在 20℃时的密度〔该值可用5.1.1方法测出的
酒精密度带入，也可用5.1.2或5.1.3测出的酒精含量反查附录A得出的密度带入〕，g／L。
1.001 80――20℃时密度瓶体积的修正系数。
4.3.5精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2％ 。

                                            表1  测总糖用表

 c×(V0-V1) ×63.55      8.80   18.50  27.00  36.00  44.00  53.00  61.00  69.00  77.00  84.00
 
            f                        0.525  0.535  0.545  0.550  0.555  0.559  0.563  0.568  0.576  0.585
 
                                             表2  测还原糖用表
 
C×(V0-V1) ×63.55     9.00   19.50  28.50  37.00  46.50  55.00  63.00  71.00  78.00  85.00
 
                 f                0.520  0.526  0.530  0.535  0.540  0.545  0.550  0.557  0.565  0.575
 
4.2.2.6精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2％ 。

4.3  干浸出物
4.3.1 原理
用密度瓶法测定样品或蒸出酒精后的样品的密度，然后用其密度值查附录C（规范性附录），求得总浸出物的含量。再从中减去总糖的含量，即得干浸出物的含量。
4.3.2  仪器
4.3.2.1  瓷蒸发皿：200 mL。
4.3.2.2  高精度恒温水浴：同5.1.1.2.3。
4.3.2.3  附温度计密度瓶：同5.1.1.2.4。
4.3.3  试样的制备
用 100 mL 容量瓶量取 100 mL样品（20℃），倒入 200 mL瓷蒸发皿中，于水浴上蒸发至约为原体积的 1／3取下，冷却后，将残液小心地移入原容量瓶中，用水多次荡洗蒸发皿，洗液并入容量瓶中，于 20 ℃定容至刻度。
也可使用5.1.1.3中蒸出酒精后的残液，在20℃时以水定容至 100 mL。
4.3.4  分析步骤
方法一：取 4.3.3试样，按4.1.1.4同样操作，并按 4.1.1.5计算出脱醇样品 20 ℃时的密度ρ1。以 ρ1×1.001 8的值，查附录 C，得出总浸出物含量（g／L）。
方法二：直接取未经处理的样品，按5.1.1.4同样操作，并按5.1.1.5计算出该样品20℃时的密度ρB。按下式计算出脱醇样品20℃时的密度 ρ2，以ρ2查附录 C，得出总浸出物含量（g／L）。
ρ2＝1.00180(ρB-ρ)+1000…………………… (7)
式中：ρ2――脱醇样品20℃时密度，g／L；
ρB――含醇样品 20℃时密度，g／L；
ρ――与含醇样品含有同样酒精度的酒精水溶液在 20℃时的密度〔该值可用5.1.1方法测出的
酒精密度带入，也可用5.1.2或5.1.3测出的酒精含量反查附录A得出的密度带入〕，g／L。
1.001 80――20℃时密度瓶体积的修正系数。
4.3.5精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2％ 。

附录A
（规范性附录）
酒精水溶液密度与酒精度（乙醇含量）对照表（略）

附录B
（规范性附录）
酒精计温度、酒精度（乙醇含量）换算表（略）

附录C
（规范性附录）
密度－总浸出物含量对照表（略）
 
附录D
（资料性附录）
葡萄酒中的糖分和有机酸的测定（HPLC法）

D.1 原理
一定量的葡萄酒样品经阴离子固相萃取柱分离与纯化，将酒样中的糖、醇和有机酸分离。分别在 Polyspher○OA KC色谱分离柱中，以稀的硫酸溶液为流动相，再经示差折光和紫外检测器检测，分别对蔗糖、葡萄糖、果糖、甘油等糖醇和柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、醋酸等有机酸定量。

D.2 试剂和材料
D.2.1  甲醇 （色谱纯）
D.2.2  浓硫酸
D.2.3  氨水 
D.2.4  氢氧化钠 
D.2.5  标准物质
D.2.5.1 柠檬酸   
D.2.5.2 酒石酸   
D.2.5.3 D-苹果酸    
D.2.5.4 琥珀酸   
D.2.5.5 乳酸 
D.2.5.6 醋酸 
D.2.5.7 蔗糖
D.2.5.8 葡萄糖
D.2.5.9 D-果糖 
D.2.5.10 甘油 
D.2.6 超纯水（实验室制备）
D.2.7 糖、醇标准储备溶液：分别称取蔗糖、葡萄糖、果糖标准品各0.05g，精确至0.0001g，用超纯水定容至50mL，该溶液分别含蔗糖、葡萄糖、果糖1g/L，称取甘油标准品0.20g，精确至0.0001g。
D.2.8 糖、醇标准系列溶液：将各糖、醇标准储备溶液用水稀释成含糖浓度为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80g/L和含甘油浓度为0.20、0.40、0.80、1.60、3.20g/L的混合标准系列溶液。
D.2.9 有机酸标准储备溶液：分别称取柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、醋酸各0.05g，精确至0.0001g，定容至50mL，该溶液分别含柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、醋酸各1g/ L。
D.2.10 有机酸标准系列溶液：将各有机酸标准储备溶液用水稀释成浓度为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80g/L的混合标准系列溶液。
D.2.11 1%硫酸溶液：2mL浓硫酸加198mL重蒸水。
D.2.12 1%氨水溶液：2mL氨水加198mL重蒸水。
D.2.13 1.5mol/L 硫酸溶液：吸取1％硫酸溶液4.35mL，用重蒸水定容至100 mL。
D.2.14 0.0015mol/L 硫酸溶液：准确吸取1mL1.5 mol/L硫酸溶液，用重蒸水定容至1000 mL。
D.2.15 0.0075mol/L 硫酸溶液：吸取1.5mol/L 硫酸溶液5mL，用重蒸水定容至1000 mL。
D.2.16 8% 氢氧化钠溶液：称取4g氢氧化钠溶于50 mL水中。

D.3 仪器
D.3.1 高效液相色谱系统：配有紫外检测器和色谱柱恒温箱。
D.3.2 色谱分离柱：Fetigsaule RT 300-7,8 KC MERCK，PN：1.51270.0001或其它分析效果类似的色谱柱。
D.3.3 强阴离子交换固相萃取柱：SupelcleanTM LC-SAX SPE (3ml) PN：57017或其它分析效果类似的固相萃取柱。
D.3.4 固相萃取装置： ALLTECH PN：210351或其它分析效果类似的装置。
D.3.5 微量注射器：50或100μL。
D.3.6 流动相真空抽滤脱气装置及0.2μm或0.45μm微孔膜。

D.4 分析步骤
D.4.1 固相萃取柱的活化
将固相萃取柱插在固相萃取装置上，加入2-3 mL甲醇，以慢速度下滴（ 约4-6滴/min ）过柱，待即将滴完时，加2-3 mL纯水，继续慢速度下滴过柱，等快滴完时再加2-3 mL1％氨水，滴至液面高度为1mm左右关上控制阀，切勿滴干。
D.4.2上样
将收集糖、醇的10mL空容量瓶置于接取处，用微量移液枪准确吸取酒样2mL加入固相萃取柱中。
D.4.2.1 第一步洗脱-糖醇洗脱
以慢滴速度过柱，滴至液面高度为1mm左右时，继续用4mL纯水分两次以慢速度下滴洗脱，将洗脱液全部收取在10mL容量瓶中，取出容量瓶，用8% 氢氧化钠溶液调节洗脱液pH至6左右,再用水定容至10mL.洗脱液即作糖、醇分离样液。
D.4.2.2 第二步洗脱-有机酸的洗脱
将收集有机酸的10mL容量瓶置于接取处，用4mL1%硫酸溶液分两次继续以慢速度下滴洗脱，最后抽干柱中洗脱溶液, 取出容量瓶，用8%氢氧化钠调节PH至6左右,再用纯水定容至10mL。洗脱液即作有机酸分离样液。
D.4.2.3 样品测定：
D.4.2.3.1 糖、醇的测定：
色谱条件
色谱柱：Fetigsaule RT 300-7,8KC MERCK，PN：1.51270.0001或其它分析效果类似的色谱柱。
柱温：30℃
流动相：0.0015mol/L硫酸溶液
流速：0.3mL/min
进样量：20μL。
在测定前装上色谱柱，调柱温至30℃，以0.3mL/min的流速通入流动相平衡。待系统稳定后按上述色谱条件依次进样。
将糖、醇混合标准液系列溶液分别进样后，以标样浓度对峰面积作标准曲线。线性相关系数应为0.9990以上。
将制备好的样品溶液进样（样品中糖、醇的含量应控制在标准系列范围内）。根据保留时间定性，根据峰面积，以外标法定量。
D.4.2.3.2 有机酸的测定：
色谱条件
色谱柱：Fetigsaule RT 300-7,8 KC MERCK，PN：1.51270.0001或其它分析效果类似的色谱柱。
柱温：55℃
流动相：0.0075mol/L硫酸溶液
流速：0.3mL/min
检测波长：210nm
进样量：20μL。
在测定前装上色谱柱，调柱温至55℃，以0.3mL/min的流速通入流动相平衡。待系统稳定后按上述色谱条件依次进样。
将有机酸标准系列溶液分别进样后，以标样浓度对峰面积作标准曲线。线性相关系数应为0.9990以上。
将制备好的样品溶液进样（样品中有机酸的含量应控制在标准系列范围内）。根据保留时间定性，根据峰面积，查标准曲线定量。

D.5 结果计算

  Xi = Ci * F……………………………………（D.1）
式中： Xi――样品中各组分的含量，g／L；
Ci――从标准曲线求得样品溶液中各组分的含量，g／L；
F――样品的稀释倍数。
计算结果保留一位小数。
D.6精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％ 。

附录E
（资料性附录）
葡萄酒中白藜芦醇的测定

E.1 HPLC法
E.1.1 原理
葡萄酒中白藜芦醇经过乙酸乙酯提取，Cle-4型柱净化，然后用HPLC法测定。
E.1.2试剂和材料
E.1.2.1 无水乙醇、95%乙醇、乙酸乙酯、甲苯、氯化钠：均为分析纯。
E.1.2.2 乙腈：色谱纯。
E.1.2.3 反式白藜芦醇（Trans-Resveratrol）：Sigma 公司。
E.1.2.4 反式白藜芦醇标准储备溶液（1.0mg/mL）：称取10.0mg 反式白藜芦醇于10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，存放在冰箱中备用。
E.1.2.5 反式白藜芦醇标准系列溶液：将反式白藜芦醇标准储备溶液用甲醇稀释成1.0μg/mL、2.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL标准系列溶液。
E.1.2.6 顺式白藜芦醇：将反式白藜芦醇标准储备溶液在254nm波长下照射30min，然后按本方法测定反式白藜芦醇含量，同时计算转化率，得顺式白藜芦醇含量，按反式白藜芦醇配制方法配制顺式白藜芦醇标准系列溶液。
E.1.3 仪器
E.1.3.1 高效液相色谱仪，配有紫外检测器；
E.1.3.2 旋转蒸发仪；
E.1.3.3 色谱柱 ODS-C18；
E.1.3.4 Cle-4型净化柱（1.0g/5mL），或等效净化柱。
E.1.4 试样的处理
E.1.4.1 葡萄酒中白藜芦醇的提取：取20.0 mL葡萄酒，加2.0g氯化钠溶解后，再加20.0mL乙酸乙酯振荡萃取，分出有机相过无水硫酸钠，重复一次，在50℃水浴中真空蒸发，氮气吹干。加2.0 mL乙醇溶解剩余物，移到试管中。
E.1.4.2 先用5mL乙酸乙酯淋洗Cle-4型净化柱，然后加样（E.1.4.1）2mL，接着用5mL乙酸乙酯淋洗除杂，然后用10mL95%乙醇洗脱收集，氮气吹干。加5mL流动相溶解。
E.1.5  HPLC法分析样品
色谱条件
色谱柱：ODS-C18柱，4.6×250mm,5µm。
柱温：室温
流动相：乙腈:重蒸水=30:70
流速：1.0mL/min
检测波长：306nm
进样量：20μL。
在测定前装上色谱柱，以1.0mL/min的流速通入流动相平衡。待系统稳定后按上述色谱条件依次进样。
用顺、反式白藜芦醇标准系列溶液分别进样后，以标样浓度对峰面积作标准曲线。线性相关系数应为0.9990以上。
将制备好的样品（E.1.4.2）进样（样品中的白藜芦醇含量应在标准系列范围内）。根据标准品的保留时间定性样品中白藜芦醇的色谱峰。根据样品的峰面积，以外标法计算白藜芦醇的含量。
E.1.6  结果计算
  Xi = Ci * F……………………………………（E.1）
式中： Xi――样品中白藜芦醇的含量，g／L；
Ci――从标准曲线求得样品溶液中白藜芦醇的含量，g／L；
F――样品的稀释倍数。
计算结果保留一位小数。
注：总的白藜芦醇含量为顺式、反式白藜芦醇之和。
E.1.7精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％ 。
E.2 GC-MS法
E.2.1 原理
葡萄酒中白藜芦醇经过乙酸乙酯提取，Cle-4型柱净化，然后用BSTFA+1%（φ）TMCS衍生后，采用GC―MS进行定性、定量分析，定量离子为444。
E.2.2 试剂和材料
E.2.2.1 BSTFA（双三甲基硅基三氟乙酰胺）+1%（φ）TMCS （三甲基氯硅烷）
其它同E.1.2 。
E.2.3 仪器
E.2.3.1 色质联用仪
E.2.3.2 旋转蒸发仪
E.2.3.3.色谱柱：HP―5 MS 5%苯基甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)
E.2.3.4 Cle-4型净化柱（1.0g/5mL），或等效净化柱。
E.2.4试样的处理
E.2.4.1葡萄酒中白藜芦醇的提取：取20.0 mL葡萄酒，加2.0g氯化钠溶解后，再加20.0mL乙酸乙酯振荡萃取，分出有机相过无水硫酸钠，重复一次，在50℃水浴中真空蒸发，氮气吹干。
E.2.4.2 衍生化：将E2.4.1处理的样品加0.1 mL BSTFA+1%TMCS，加盖瓶于旋涡混合器上震荡，在80℃下加热0.5 h，氮气吹干，加1.0mL甲苯溶解。
E.2.4.2 取适量的白藜芦醇标准溶液，氮气吹干，按E2.4.2进行衍生化。
E.2.5 GC-MS法测定
质谱条件：
――柱温程序：初温150℃，保持3 min，然后以10℃／min升至280℃，保持10min；
――进样口温度：300℃
――载气为高纯氦气（99.999%），流速0.9mL/min，
――分流比：20：1
―― EI源源温 230℃
―― 电子能量70eV
―― 接口温度280℃
――电子倍增器电压1765V
――质量扫描范围（Scan mode m/z）35～450amu,
―― 定量离子444；
――溶剂延迟：5 min
――进样量1.0μL

E.2.6 结果计算
    同E.1.6 。
E.2.7精密度
    在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％ 。

附录F
（资料性附录）
葡萄酒、山葡萄酒感官评定要求
F.1 基本要求
F.1.1环境的要求             
F.1.1.1品尝室的要求
 ――应有适宜的光线，使人感觉舒适。
 ――应便于清扫，且离噪声源较远，最好是隔音的。
 ――无任何气味，并便于通风与排气。
F.1.1.2 光源
品尝室的光源可用自然日光或日光灯，但光线应为均匀的散射光。
F.1.1.3 温度与湿度
品尝室内，应保持使人舒适的、稳定的温度和湿度，温度和湿度应分别保持在20℃～22℃和60%～70%之间。
F.1.1.4 品尝间
品尝间应相互隔离，内部设施应便于清洗，便于比较葡萄酒的颜色；应有可饮用的自来水龙头，自来水的龙头最好是脚踏式的，以便于品尝员的双手工作。
F.1.2品尝杯的要求
应采用葡萄酒标准品尝杯。标准杯由无色透明的含铅量为9%左右的结晶玻璃制成，不应有任何印痕和气泡；杯口应平滑、一致，且为圆边；品尝杯应能承受0℃～100℃的温度变化，其容量为210～225ml。
F.1.3 人员要求
必须由取得相应资质（应届国家评酒员）的人员进行品评，一般掌握单数，人员尽可能多，最少不得低于7人。
F.1.4 样品的处理
将样品放置于20℃±2℃环境下平衡24h（或20℃±2℃水浴中保温1h）后，采取密码标记后进行感官品评。
注：被评样品的相关信息应对评酒员严格保密。
F.1.5 计分方法
每个评酒员按细则要求在给定分数内逐项打分后，累计出总分，再把所有参加打分的评酒员分数累加，取其平均值，即为该酒的感官分数。

F.2 评分标准用语
   见表F.1。
F.3 葡萄酒评分细则
   见表F.2。
F.4 山葡萄酒评分细则
   见表F.3。                

     表F.1  评分标准用语 分 数 段

特 点

葡萄酒

山葡萄酒

90分 以上

85分 以上

具有该产品应有的色泽，悦目协调、澄清（透明）、有光泽；果香、酒香浓馥幽雅，协调悦人；酒体丰满，有新鲜感，醇厚协调，舒服，爽口，回味绵延；风格独特，优雅无缺。

89-80分

84-75 分

具有该产品的色泽；澄清透明，无明显悬浮物，果香、酒香良好，尚悦怡；酒质柔顺，柔和爽口，甜酸适当；典型明确，风格良好。

79-70分

74-65 分

与该产品应有的色泽略有不同，澄清，无夹杂物；果香、酒香较少，但无异香；酒体协调，纯正无杂；有典型性，不够怡雅。

69-65分

64-60 分

与该产品应有的色泽明显不符，微浑，失光或人工着色；果香不足，或不悦人，或有异香；酒体寡淡、不协调，或有其他明显的缺陷。 （除色泽外，只要有其中一条，则判为不合格品。）

64-55分

59-50 分

不具备应有的特征。

                          表F.2 葡萄酒评分细则 项 目

要 求

外 观 10分

色 泽 5分

白葡萄酒 （含加香葡萄酒）

近似无色，浅黄色，禾杆黄，绿禾杆黄色，金黄色，琥珀黄色

红葡萄酒 （含加香葡萄酒）

紫红，深红，宝石红，鲜红，瓦红，砖红，黄红，棕红，黑红色

桃红葡萄酒 （含加香葡萄酒）

黄玫瑰红，橙玫瑰红，玫瑰红，橙红，浅红，紫玫瑰红色

5分

澄清 程度

澄清透明、有光泽、无明显悬浮物（使用软木塞封的酒允许有3个以下不大于1mm的木渣）

起泡 程度

起泡葡萄酒注入杯中时，应有细微的串珠状气泡升起，并有一定的持续性，泡沫细腻、洁白。

　 香 气 30分

非加香葡萄酒

具有纯正、优雅、愉悦和谐的果香与酒香

加香葡萄酒

具有优美纯正的葡萄酒香与和谐的芳香植物香

滋 味 40分

干、半干葡萄酒 （含加香葡萄酒）

酒体丰满，醇厚协调，舒服，爽口。

甜、半甜葡萄酒 （含加香葡萄酒）

酒体丰满，酸甜适口，柔细轻快。

起泡葡萄酒

口味优美、醇正、和谐悦人，有杀口力

加气起泡葡萄酒

口味清新、愉快、纯正，有杀口力

典型性20分

典型完美、风格独特，优雅无缺                    　

表F.3 山葡萄酒评分细则   项 目

要 求

外 观 10分

色泽 5分

桃红葡萄酒 （含加香葡萄酒）

黄玫瑰红，橙玫瑰红，玫瑰红，橙红，浅红，紫玫瑰红色

红葡萄酒 （含加香葡萄酒）

紫红，深红，宝石红，鲜红，瓦红，砖红，黄红，棕红，黑红色

5分

澄清程度

澄清透明、无明显悬浮物。用软木塞封口的酒，允许有3个以下不大于1mm的软木渣

起泡程度

山葡萄酒注入杯中时，应有洁白或微带红色的气泡

香气 30分

山葡萄酒

具有纯正、优雅、和谐的果香与酒香

加香山葡萄酒

具有和谐的芳香植物香与山葡萄酒香

滋 味 40分

干、半干山葡萄酒 （含加香葡萄酒）

酒体丰满，醇厚协调，舒服，爽口

甜、半甜山葡萄酒 （含加香葡萄酒）

酒体丰满，酸甜适口，柔细轻快

山葡萄汽酒

口味优美、醇正、和谐悦人，有杀口力

典型性20分

典型完美、风格独特，优雅无缺

谢谢,楼主

谢谢，楼主，帮帮忙发一个

附录A
（规范性附录）
酒精水溶液密度与酒精度（乙醇含量）对照表

我并不为楼主的标题所吸引，也不为贴子的内容所迷惑。
我不是来抢沙发的，也不是来打酱油的。
我不是来为楼主呐喊加油的，也不是对楼主进行围堵攻击的。
我只是为了成为管理员而默默奋斗。。。

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