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食品中合成着色剂的测定方法 GB/T 5009.35
Method for determination of synthetic colour in foods
1 范围
本标准规定了食品中合成着色剂的测定方法。
本标准适用于食品中合成着色剂的测定。
第一篇 高效液相色谱法 (第一法) 省略
第二篇 薄层色谱法 (第二法) 省略
第三篇 微机极谱法 (第三法)
10 原理
食品中的合成着色剂，在特定的缓冲溶液中，在滴汞电极上可产生敏感的极谱波，波高与着色剂的浓度成正比。当食品中存在一种或两种以上互不影响测定的着色剂时，可用其进行定性定量分析。
11 试剂
11.1 底液Ａ: 磷酸盐缓冲液(常用于红色和黄色复合色素)，可作苋菜红、胭脂红、日落黄、柠檬黄以及靛蓝着色剂的测定底液。
称取13.6g无水磷酸二氢钾（KH2 PO4）和14.1g无水磷酸氢二钠（Na2 HPO4 ）[或35.6g含结晶水的磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）]及10.0g氯化钠，加水溶解后稀释至1L。
11.2 底液B：乙酸盐缓冲液(常用于绿色和蓝色复合色素)，可作靛蓝、亮蓝、柠檬黄、日落黄着色剂的测定底液。
量取40.0mL冰乙酸，加水约400mL，加入20.0g无水乙酸钠，溶解后加水稀释至1L。
11.3 柠檬酸溶液：200g/L。
11.4 乙醇-氨溶液：取1mL浓氨水,加乙醇(70%)至100mL。
11.5 着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为100%质量的人工合成着色剂0.100g，溶解后置于100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液1mL含1.00 mg着色剂。
11.6 着色剂标准使用溶液：吸取着色剂标准溶液1.00mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液1mL含10.0mg着色剂。
12 仪器
12.1 微机极谱仪。
12.2 常用玻璃仪器。
13 分析步骤
13.1 样品处理
13.1.1 饮料和酒类：取样10.0～25.0mL，加热驱除CO2和乙醇，冷却后用200g／L NaOH 和 HCl（1＋l）校至中性，然后加蒸馏水至原体积。
13.1.2 表层色素类：取样5.0～10.0g，用蒸馏水反复漂洗直至色素完全被洗脱。合并洗脱液并定容至一定体积。
13.1.3 水果糖和果胨类：取样5.0g，用水加热溶解，冷却后定容至25.0mL。
13.1.4 奶油类：取样5.0g于50 mL 离心管中，用石油醚洗涤三次，每次约20～30mL，用玻棒搅均，离心，弃上清液。低温挥去残留的石油醚后用乙醇—氨溶液溶解并定容至25.0 mL，离心，取上清液一定量水浴蒸干，用适量的水加热溶解色素，用水洗入10 mL容量瓶并定容。
13.1.5 奶糖类：取样5.0 g 溶于乙醇—氨溶液至25.0 mL，离心。取上清液20.0 mL，加水 20 mL，加热挥去约20mL。冷却，用200 g／L柠檬酸调至pH4，加入200目聚酰胺粉0.5～1.0 g，充分搅拌使色素完全吸附后，用30～40mL酸性水洗入50 mL离心管，离心，弃上层液体。沉淀物反复用酸性水洗涤3～4次后，用适量酸性水洗入含滤纸的漏斗中。用乙醇—氨溶液洗脱色素，将洗脱液水浴蒸干，用适量的水加热溶解色素，用水洗入10 mL容量瓶并定容。
13.2 测定
13.2.1 极谱条件：滴汞电极，一阶导数，三电极制，扫描速度250mv/s，底液Ａ的初始扫描电位为-0.2 V，终止扫描电位为-0.9 V。参考峰电位为苋菜红-0.42V、日落黄-0.50V、柠檬黄-0.56V、胭脂红-0.69V、靛蓝-0.29V。底液B的初始扫描电位为0.0 V，终止扫描电位为-1.0 V。参考峰电位（溶液、底液偏酸使出峰电位正移，偏碱使出峰电位负移）：靛蓝-0.16V、日落黄-0.32V、柠檬黄-0.45V、亮蓝-0.80V。
13.2.2 标准曲线:吸取着色剂标准使用溶液0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00mL分别于10mL比色管中，加入5.00mL底液,用水定容至10.0mL, (浓度分别为0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00mg/mL)。混匀后于微机极谱仪上测定。0为试剂空白溶液。
13.2.3 样品测定：取样品处理液1.00 mL,或一定量(复合色素峰电位较近时，尽量取稀溶液), 加底液5.00 mL, 加水至10.00 mL,摇匀后与标准系列溶液同时测定。
13.3 计算
Cx×10×1000
X = ──────────────
m× V1/V2 × 1000×1000
式中：X — 样品中着色剂的含量，g/L(kg)；
Cx — 样品测定液中着色剂的含量,mg/mL；
m — 样品取样质量(体积),g(mL);
V1 — 样品测定液中样品处理液的体积,mL;
V2 — 样品稀释后的总体积,mL;
结果的表述:报告算术平均值的二位有效数。
13.4 允许差
相对相差≤10%。
注释：本标准于1997年“全国食品卫生标准专业委员会第十二次会议”讨论通过，将其并入GB/T5009国家标准检验方法。
