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ACQUITY UPLC 色谱柱 Waters技术支持
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ACQUITY UPLC 色谱柱
ACQUITY UPLC? 色谱柱和VanGuard? 保护柱是液相色谱领域迄今为止技术最为领先的液相色谱柱,具备小颗粒的所有潜能和优势,在提供更高分离度的同时获得更快的分析速度。经过设计、测试确保用于高达15000psi (相当于1000 bar)压力的条件,具有无与伦比的柱效和耐用性。
超过五十种不同规格和不同键合相的色谱柱供选用,包括br/>1.7 μm的 BEH UPLC? 颗粒
1.8 μm 的HSS UPLC颗粒
七种不同的键合相
反相柱和HILIC色谱柱
UPLC 技术
ACQUITY UPLC? 色谱柱是沃特世公司专门为扩散体积很低的 UPLC? 系统而设计的,ACQUITY UPLC全新的设计极大地提高了分离度,样品通量和检测灵敏度。
UPLC 提供极大的灵活性– 速度,灵敏度和分辨率
无论是追求最快的分析速度还是最高的分离度,UPLC能够兼得,为实验室分析提供了极大的灵活性。
UPLC颗粒
BEH颗粒
第一个经过UPLC?测试和认证的填料颗粒1.7μm的BEH 颗粒,它采用专利的第二代杂化颗粒技术(BEH TechnologyTM),具有高柱效、宽pH使用范围(1-12)、极好的稳定性和超长的使用寿命。目前,ACQUITY UPLC BEH 颗粒的键合化学包括C18/C8/Shield RP18/Phenyl/HILIC五种,使方法开发的更加快速、便捷。
同时,沃特世公司提供基于同样填料技术的HPLC色谱柱系列XBridge?, 有2.5, 3.5, 5 和 10 μm不同粒径,保证HPLC方法无间隙地转换到 UPLC。
BEH 颗粒: UPLC核心技术之一
HSS(高强度)硅胶颗粒
第二个UPLC 颗粒是1.8 μm 的ACQUITY UPLC? HSS (高强度硅胶)颗粒,它是首次为在15000psi(相当于1000bar)压力下使用而合成的100%超纯硅胶颗粒,它完全不同于HPLC硅胶填料颗粒,是经过UPLC测试和认证的可以耐受UPLC操作压力的填料颗粒。目前,ACQUITY UPLC? HSS色谱柱的键合化学包括C18, C18 SB 和 T3三种。
专门设计并经过耐压测试的UPLC 颗粒
沃特世专有的填料颗粒强度测试过程如下:将色谱颗粒装填到色谱柱中,开启流动相流速。随着压力的升高,颗粒被压碎,流动相流动受阻。根据偏离理想曲线(线性)的程度表示颗粒机械强度的优劣。沃特世的BEH 和 HSS颗粒是液相色谱领域两个耐受超高压的多孔色谱颗粒,表现优异。
ACQUITY UPLC HSS C18 SB色谱柱
ACQUITY UPLC? C18 SB色谱柱为色谱工作者在日常LC方法开发工作中考察不同ACQUITY UPLC?色谱柱的分离选择性而设计。我们设计ACQUITY UPLC HSS C18 SB色谱柱用于在低pH流动相条件下分离碱性化合物和非碱性化合物组成的混合物,同现代高C18覆盖率和完全端基封尾的C18柱相比,这款色谱柱能够提供完全不同的分离选择性。
我们是如何设计色谱柱达到这样的效果呢?沃特世公司专门研究色谱填料的科学家们在HSS硅胶基体上采用三键键合技术,键合了中等配体密度(约1.6 μmol/m2)的C18配体,而且没有对游离硅羟基进行端基封尾。一般来说,同现代的高C18覆盖率完全端基封尾的C18色谱柱相比,较高活性的硅羟基将增强碱性化合物的保留,而中等C18配体密度能够对非碱性化合物产生较弱(或相当)的保留。从色谱理论分析,这种独特的键合和端基封尾组合将成为复杂UPLC分离方法开发工作中一个实用且方便的工具。
三环类抗抑郁药的快速分离
三环类抗抑郁药(TCA)属于仲胺和叔胺类化合物,是抑郁症患者常用的处方药。选择性五羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)类药物正在逐渐替代TCA药物。同完全端基封尾的反相色谱柱相比,ACQUITY UPLC HSS C18 SB色谱柱的填料颗粒表面由于硅羟基活性更强,因此对碱性药物如三环抗抑郁药具有更强的保留。
ACQUITY UPLC BEH Phenyl苯基柱
ACQUITY UPLC? BEH Phenyl 苯基柱为所有类型化合物带来互补的分离选择性,pH稳定性好,峰形尖锐对称。它采用三键键合的C6苯基和同 ACQUITY UPLC BEH C18 和C8色谱柱相同的端基封尾技术,具有极低的键合相流失,柱寿命更长,峰形更加尖锐对称。1.7 μm BEH颗粒结合独特的配体键合化学,为UPLC?分离具有挑战性的混合物带来不同的分离选择性和高效率。
紫锥菊中咖啡酸衍生物的分离
紫锥菊提取物中的活性成分主要分成三类: 咖啡酸衍生物,多糖和亲脂性组分。研究表明常见的紫锥菊提取物的质量千差万别,需要有科学的方法检测活性成分的含量。上图展示了对具有抗氧化作用的多酚类化合物的快速分析结果。
ACQUITY UPLC HSS 系列色谱柱
ACQUITY UPLC? HSS (高强度硅胶)色谱柱采用1.8 μm 高强度硅胶(HSS)颗粒,是首次为15000psi(相当于1000bar)压力下使用而合成的100%超纯硅胶颗粒,它完全不同于HPLC硅胶填料颗粒,是经过UPLC测试和认证的可以耐受UPLC操作压力的填料颗粒。
目前,ACQUITY UPLC HSS色谱柱的键合化学包括T3和C18两种,其中T3是设计用于保留和分离极性有机物的色谱柱,能够耐受100%的纯水相流动相而不会出现“相塌陷”的问题,其性质同Atlantis? T3 HPLC色谱柱相近 ;最新推出的ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱是超高柱效的C18键合相,为碱性化合物提供优异的峰形;同ACQUITY UPLC BEH C18相比,HSS C18提供更强的保留,而且在低pH流动相条件下具有极好的柱寿命。
专门设计并经过耐压测试的UPLC 颗粒
沃特世专有的填料颗粒强度测试过程如下:将色谱颗粒装填到色谱柱中,开启流动相流速。随着压力的升高,颗粒被压碎,流动相流动受阻。根据偏离理想曲线(线性)的程度表示颗粒机械强度的优劣。沃特世的BEH 和 HSS颗粒是液相色谱领域两个耐受超高压的多孔色谱颗粒,表现优异。
VanGuard 保护柱
VanGuard? 保护柱是沃特世公司经过两年多研发后推出来的第一个应用于ACQUITY? UPLC系统的保护柱,完全耐受15000 psi (相当于1000 bar)的超高效液相色谱操作压力。VanGuard 保护柱的内径是2.1 mm,长度为 5 mm,具有超低的“柱外效应”,可有效保障UPLC? 色谱柱的柱效。VanGuard保护柱使用与ACQUITY UPLC? 色谱柱相同的固定相和筛板【相关设计正在申请专利】,在使用时直接同ACQUITY UPLC色谱柱入口端连接,从而将柱外效应和流动相漏液的情况降到最低,不会影响UPLC系统的整体分离性能。
VanGuard保护柱的主要特性和优势
VanGuard 保护柱产生极小的柱外色谱效应
VanGuard 保护柱专门设计用于保护ACQUITY UPLC 色谱柱并延长其使用寿命,同时具有极低的柱外效应。
ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱
ACQUITY UPLC? HSS C18色谱柱采用三键键合C18配体和沃特世专有的端基封尾技术,在中等pH流动相条件下对碱性化合物有很好的峰形,同时能够有效抑制酸性条件下键合相的水解,从而延长了低pH值条件的柱寿命。由于HSS颗粒是100%的超纯硅胶,ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱能够在苛刻的强酸性流动相条件下使用,并且具有优异的性能。
由于pH值是LC方法开发中调控可离子化的化合物色谱分离选择性的重要参数,因此色谱柱在低pH条件下(如 pH < 2)性能稳定至关重要。ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱是迄今为止市场上对酸性条件最稳定的色谱柱系列,它完全不同于市场上较早出现的“立体位阻键合技术”的耐酸色谱柱(此类色谱柱没有进行端基封尾,碱性化合物峰形很差)。
ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱在低pH值条件下具有最好的稳定性
低pH值下的稳定性对照数据:色谱柱分别在0.5% TFA ,60 °C条件下进行21小时强化破坏试验
上述对照试验中,以中性标记物对羟苯甲酸甲酯保留因子的降低情况来表征酸性条件下键合相的水解程度。ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱由于采用了新型的键合和端基封尾技术,因此在强酸性条件下性能最佳。
ACQUITY UPLC BEH C18 和 C8 色谱柱
ACQUITY UPLC? BEH C18 和C8 色谱柱适用的pH范围很宽(1-12),是UPLC?分离中的通用型色谱柱。它们采用三键键合化学,具有卓越的低pH稳定性和极低的键合相流失。1.7 μm BEH颗粒在低pH值以及高pH值的卓越稳定性使得UPLC? BEH C18 和C8具有最宽的pH操作范围。
此外,这些色谱柱采用沃特世专有技术进行端基封尾,保证碱性化合物的峰形。ACQUITY UPLC BEH C18 和 C8 色谱柱提供尖锐对称的色谱峰,最高的柱效和LC-MS检测灵敏度。
分离选择性的更优选择
EPA 方法8330 用HPLC分离爆炸物,要求温度控制在 ± 1 °C之间,这是因为温度的较小变化可引起分离选择性的很大偏移。而UPLC由于分离度高,可以很容易得到稳定耐用的方法,从而减小了方法对温度变化的敏感性 (温度控制在 ± 5 °C即可)。
ACQUITY UPLC BEH Shield RP18 色谱柱
ACQUITY UPLC? BEH Shield RP18 色谱柱提供与ACQUITY UPLC BEH C18 / C8 互补的分离选择性。它们将沃特世公司专利的“屏蔽”键合相技术(Shield Technology*)和亚乙基桥杂化颗粒技术(BEH Technology?)相结合,将氨基甲酸酯官能团嵌入键合相的烷基链。沃特世嵌入极性基团“屏蔽”型键合相和直链烷基键合相色谱柱相比,增强了酚类化合物的保留,并同时提供互补的分离选择性和更好的峰形。宽pH值范围和高效的1.7 μm BEH颗粒结合嵌入极性基团键合相,为UPLC方法开发提供了强有力的工具。
止痛药的快速分离
药店销售的止痛药用于减轻疼痛,价格低廉,效果好且安全,是大多数内科医师推荐的首选药物。如上图所示,止痛药物中的七种组分在1.5分钟之内得到分离,需要注意 BEH Shield RP18嵌入极性基团键合相带来的分离选择性变化。
ACQUITY UPLC BEH HLIC 色谱柱
ACQUITY UPLC? BEH HILIC色谱柱是1.7 μm没有键合的BEH颗粒,专门用于保留和分离强极性的碱性化合物。经优化和严格测试的此系列色谱柱能够在UPLC? HILIC条件下实现高效、重现的分离,它克服了其它HILIC色谱填料化学稳定性差的缺点。坚固的BEH颗粒具有广泛的pH使用范围,极大地提高了色谱柱的化学稳定性,延长了柱寿命。
采用ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱实现强极性碱的分离
鸦片类镇痛剂如吗啡可用于控制慢性和急性疼痛,由于这种类型的药物药性极强,因此服用剂量一般很低,体液内的药物浓度也很低。对吗啡的功效代谢研究以及在人体内药代动力学研究要求使用选择性好、灵敏度高的分析方法,如亲水相互作用色谱法(HILIC)。在上图所示的HILIC分离中,极性较弱的母体化合物吗啡先出峰,而极性较强的代谢物吗啡-3- ?-葡糖苷酸随后流出。
ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱
ACQUITY UPLC? HSS T3 色谱柱使用沃特世公司创新的专有T3键合技术,先进的T3键合技术同样用于Atlantis? T3 高效液相色谱柱,是色谱行业内领先的极性化合物保留解决方案,它完全兼容纯水相流动相,具有极低的键合相流失,LC-MS本底信号极低。T3键合技术采用三键C18 烷基键合,配基密度低,可以提高极性化合物的保留并与水相流动相“兼容”;同时,T3技术还包括比传统三甲基氯硅烷(TMS) 更有效的端基封尾过程。独特的键合与封尾技术确保T3色谱柱对极性化合物有很好的保留,和纯水相流动相兼容,并同时提高了柱效、柱寿命、改善了峰形和稳定性。
ACQUITY UPLC BEH 颗粒有很宽的pH 范围和极好的峰形,然而由于填料的疏水特性,不能够提高亲水极性化合物的保留,ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱设计用于在反相UPLC?条件下保留和分离极性有机化合物,与ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱相比,大多数化合物在ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱上的保留更强。
卓越的极性化合物保留能力
ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱比 ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱对极性化合物的保留更强,是目前色谱领域对极性化合物具有最佳保留特性的亚2微米颗粒的色谱柱。
ACQUITY UPLC系统配件
沃特世提供一系列高品质的附件用于ACQUITY UPLC? 系统br/>滤膜
我们推荐您在进行分析前使用0.2 μm的滤膜分别过滤流动相缓冲液和样品,这样可防止颗粒性杂质在色谱柱和仪器堆积,从而延长色谱柱寿命,并将停机时间降到最低。使用0.2 μm GHP 滤膜过滤水相流动相、非极性溶剂和蛋白。
Description Part No.
Sirocco Protein Precipitation Plate, single pack 186003873
Sirocco Protein Precipitation Plate, 5 pack 186002448
样品瓶
推荐在UPLC?系统上使用带预开口瓶垫的样品瓶,预开口瓶垫为适当通气而设计,重复取样的体积重现性好。沃特世提供 LC 认证样品瓶和LCMS 认证样品瓶。
Sirocco? 蛋白沉淀板
Sirocco 蛋白沉淀板用于高通量蛋白沉淀,独特的过滤系统—通气盖垫和专利阀技术—使您可以在96孔板内进行样品处理,并收集极小体积的血浆处理滤液而无需多余的样品转移操作。
Description Part No.
Solvent filtration membranes 47 mm disc 100 pk* 186003524
13 mm Mini spike 100 pk (< 14 μL hold up volume) WAT097962
25 mm 50 pk (< 100 μL hold up volume) WAT097964
Requires solvent filtration apparatus, WAT200543 or equivalent
HPLC to UPLC 方法转换
成功的LC液相方法转换需要至少保持或进一步改善原有的分离,其过程需要仔细考虑并理解诸如色谱柱规格,系统体积和配置,进样体积,待分析物的分子量和梯度曲线等重要参数,否则将不能得到满意的结果。待。
进行LC方法转换需要进行很多的计算,以往大都采用人工计算,费时费力且容易出错。
HPLC 转换到 UPLC非常简单
ACQUTY UPLC? 色谱柱计算器帮助色谱工作者快速准确地将现有HPLC方法转换至 UPLC ?方法
ACQUITY UPLC? Columns Calculator 色谱柱计算器是容易使用,功能强大的软件工具,精确处理方法转换过程中的计算,包括等度条件和梯度条件的方法。从ACQUITY UPLC? 色谱柱计算器提供的UPLC 方法中根据您的目标进行在如下选项中进行选择:最快速度,最大分离度或二者兼有。
ACQUITY UPLC Columns Calculator 色谱柱计算器包括如下UPLC方法选项:
UPLC 方法,可保留原来HPLC方法的分离选择性和分离度
更快的UPLC 方法,保证高通量和高分析效率,却不会牺牲分离度
更高分离度的UPLC 方法,对分析数据更有信心,却不需延长分析时

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