1#

仪器及试剂:东西电子液相色谱仪(LC5500)色谱纯甲醇;0.02mol/L乙酸铵
溶液;浓度为1.00mg/ml的柠檬黄、苋菜红、胭脂
红、日落黄、苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准溶液

色谱柱: GEM - C18 (dp 5μm4. 6mmID×
250mm;保护柱:C18;柱温:室温;流动相:甲醇-
0.02mol/L乙酸铵(20/80,v/v);流速:1ml/min
波长:240nm;进样20μl

样品处理:同GB/T5009.35-200   固体样品:取5~10g样品粉碎,加1mol/L的NaOH 1ml,超声波震荡15分钟,定容到50ml

分别取经0.45μm滤膜过滤的合成色素
标准使用液、标准混合液及样品色素提取液各
20μl,注入高效液相色谱仪分析测定,根据谱峰保留
时间、峰面积与标准峰比较,进行定性、定量。

流动相配比的选择:流动相的选择关系到检
测的分离度、灵敏度、检出限。试验表明,在C18柱
中,甲醇、0.02 mol/L乙酸铵是以上几种物质分离的理
想的洗脱液,但需选择合适的配比,甲醇比例过大,
可造成分离不完全;甲醇比例过小,又使得运行时间
拖长,且后面的谱峰展宽,难以检测。本试验通过改
变二者的比例[2],以5/95、10/90、20/80、25/75(v/
v)的比例分别进行分离实验,选择出甲醇与乙酸铵
比例为20/80(v/v)时,分离度和分析时间均能得到
较好的效果。

流速的选择:流速的大小直接影响柱及系统
的压力、各组分离度、洗脱时间,在流动相选定之后,
则需选择最佳分离度、最佳分析时间的流速。流速
太小,分析时间长且后流出组分峰型变差;流速太
大,导致系统压力增高,容易冲塌柱,本试验以0.5、
0.8、1.0和1.2 ml/min流速进行试验,选定1.0mL/min流速最佳。

,在不具备梯度洗脱设备条件下,也可
通过等梯度进行常见合成著色剂以及几种常见添加剂的分析检测,并且在满足检验要求的同时,简化了一些检验步骤,缩短检验时间。