花生抗真菌蛋白的纯化及活性鉴定
中国食品科学技术学会核心期刊中国食品学报2006年第1期243页
李奕雅 汪少芸 叶秀云 陈躬瑞 饶平凡
（福州大学生物科学与工程学院 福州 350002）
摘要 利用亲和色谱Affi-gel和葡聚糖凝胶色谱Sephadex G-75从花生种子中分离出一种抗真菌蛋白。试验结果表明：此种纯化的抗真菌蛋白对植物致病菌苹果轮纹病菌（Physalospora piricola）、棉花枯萎菌（Fusariumoxysporum）、瓜果腐霉病菌（Pythium apHanidermatum）的生长具有明显抑制作用。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定达到电泳纯，分子质量为34.4kDa。还原和非还原状态下的此抗真菌蛋白均显示单一区带，说明该抗真菌蛋白为单倍体蛋白。
关键词 花生 抗真菌蛋白 纯化 电泳 分子质量
文章编号 1009-7848（2006）01-0243-04
植物对微生物的防御一直是植物病理学研究的热点之一。病菌危害是世界范围内农作物减产的重要原因。植物的生长随时可能遭受微生物的侵袭，现有研究表明，植物虽然没有像哺乳动物那样有特异的免疫系统，但它非特异的天然免疫体系却十分惊人。不同类型的、具有抗真菌作用的物质如：过氧化氢酶、裂解酶、次生代谢物质以及抗菌蛋白（如病原相关蛋白，PR蛋白）和抗菌肽等在植物中广泛存在[1]。
花生（Arachis hpyogaea）又名为落地花生，在民间被称为长生果。它属于豆科作物，素有“中国坚果”、“绿色牛奶”和“素中之荤”的美称。由于其营养丰富，被人们誉为“植物肉”。此外它还是高蛋白（含32%）的油料作物[2]。花生具有一定的医用价值，花生仁补脾润肺，治脾虚肺弱，痰喘咳嗽；花生红衣皮味甘微苦，性平止血散瘀，消肿，临床报道对多种出血症有明显的止血效果；花生叶安神，治失眠[3]。花生中含有不同的植物抗真菌蛋白和抗菌肽。Ye等[4]利用蓝胶亲和色谱和CM-Sepharos离子色谱介质，从花生种子提取液中分离、纯化得到花生hypogin抗菌肽，其分子质量为7.2kDa。N-端氨基酸序列分析显示该蛋白与花生过敏源AraH1具有同源性。活性试验表明，它对花生褐斑病菌、棉花枯萎病菌、毛头鬼伞菌有很强的抗植物致病真菌活性，且具有抑制HIV逆转录病毒的活性和对小鼠脾细胞增殖反应的削弱作用。本文就分离纯化某种花生抗菌蛋白及其活性鉴定进行了研究。
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