一、标准曲线的制备：
吸取1mL浓度分别为5-75μg/mL的半乳糖醛酸标准溶液于25mL具塞试管中，置于冰水浴中冷却数分钟，然后，用振荡器边振动边加入6mL0.0125M的H2SO4/四硼酸钠溶液，在沸水浴中加热5分钟，然后立即放入冰水浴中冷却，冷却后，加入0.1mL0.15%间苯基苯酚溶液进行显色，取出试管，充分振摇，室温静置15～20分钟，待气泡消失后，在520nm测定吸光度A。制定吸光度A和半乳糖醛酸标准溶液浓度之间的标准曲线。二者具有良好的线性关系。
二、半乳糖醛酸样液的测定
用同样方法测定样液中的半乳糖醛酸含量。不过要消除试剂和样液中其它糖份或其他组分带来的误差。
试剂空白和样品空白的测定：
在上述操作中，以1mL蒸馏水和0.1mL0.5%的氢氧化钠溶液分别代替样液和间苯基苯酚溶液，最后所得溶液作为试剂空白；
仅以0.1mL0.5%的氢氧化钠溶液代替间苯基苯酚溶液进行上述操作所得溶液作为样品空白A1。最后样品试剂吸光度应为A2=A-A1。
希望该方法对大家有所帮助！
