涂抹检验
(一)涂抹操作规程:
1.进入车间先经过消毒池消毒;
2.在洗手池洗手消毒;
3.涂抹前用75%的酒精棉球消毒手和镊子;
4.用消毒镊子取25cm2湿润灭菌涂抹纸(或涂沫棒),贴(或涂)于被涂抹物表面,使之充分接触,贴完50 cm2后,立即放入装有50ml灭菌生理盐水的三角瓶中,盖好瓶塞,使涂抹纸与盐水充分混合并做好标识,在4h内进行菌落总数和大肠菌群的测定。
(二)菌落总数的测定:
1.检样前使三角瓶内生理盐水与涂抹纸充分摇匀,
使之充分接触。
2.用1ml灭菌吸管吸取1ml液体,注入灭菌平皿内且做两个平皿。
3.及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿(沿同一方向)使混合均匀。
4.待琼脂凝固后,翻转平板置36±1℃温箱内培养48±2h。
(三)大肠菌群的测定:
用10ml灭菌吸管吸取10ml液体,沿管壁缓缓注入装有10ml双料乳糖胆盐发酵管内,接种3个试管;
用1ml灭菌吸管吸取1ml液体,沿管壁缓缓注入装有10ml单料乳糖胆盐发酵管内,接种3个试管;
用1ml灭菌吸管吸取1ml液体,沿管壁缓缓注入装有9ml生理盐水的试管内,混匀做成1:10的稀释液;
用1ml灭菌吸管吸取1ml1:10的稀释液,沿管壁缓缓注入装有10ml单料乳糖胆盐发酵管内,接种3个试管;
做好标记置于36±1℃温箱内培养24±2h。
注意事项:
1.保证涂抹面积50平方厘米。
2.操作前要对手和镊子彻底消毒。
3.要保证在4小时内进行检测。